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宠物基因鉴定实验操作面试题中级

一、单选题（共10题，每题2分，共20分）

题目：

1.在宠物基因鉴定实验中，常用的DNA提取方法不包括以下哪项？

A.热煮沸法

B.SDS-蛋白酶K法

C.酚-氯仿法

D.化学裂解法

2.用于PCR扩增宠物DNA时，引物设计的基本原则不包括以下哪项？

A.引物长度一般为18-25bp

B.Tm值在55-65℃之间为宜

C.引物内部不应存在二级结构

D.引物之间应有高度同源性

3.在基因测序过程中，Sanger测序法的主要原理是？

A.基于荧光标记的片段长度测序

B.基于电容变化的信号检测

C.基于等温扩增的信号分析

D.基于芯片微流控的实时测序

4.宠物基因分型中，SNP位点检测的主要技术手段不包括？

A.KASP检测

B.微阵列芯片分析

C.高通量测序

D.等位基因特异性PCR

5.DNA样本保存时，以下哪种条件最有利于维持其完整性？

A.4℃保存，加EDTA缓冲液

B.-20℃保存，避光干燥

C.37℃保存，加入甘油保护剂

D.25℃保存，定期补充TE缓冲液

6.宠物基因鉴定报告中，以下哪项信息通常不包含？

A.样本编号及来源

B.基因型检测结果

C.个体亲缘关系分析

D.宠物市场销售建议

7.用于基因扩增的PCR反应体系中，以下哪种物质是必需的？

A.蛋白酶K

B.dNTPs

C.RNA酶

D.氯仿

8.在基因测序数据分析中，用于比对参考基因组的工具不包括？

A.BLAST

B.Samtools

C.QGIS

D.GATK

9.宠物DNA提取时，若出现提取效率低的情况，可能的原因是？

A.样本保存不当

B.蛋白酶K用量不足

C.氯仿用量过多

D.DNA酶残留污染

10.基因分型中，STR（短串联重复序列）分析的主要应用场景是？

A.基因功能研究

B.个体识别

C.表观遗传调控分析

D.药物代谢动力学研究

二、多选题（共5题，每题3分，共15分）

题目：

1.影响PCR扩增效率的因素包括哪些？

A.引物浓度

B.Mg2?离子浓度

C.DNA模板质量

D.循环次数

E.聚合酶活性

2.宠物基因测序数据质控的主要步骤包括？

A.去除低质量读长

B.填充N值区域

C.检测PCR重复序列

D.评估GC含量分布

E.校正测序接头污染

3.用于宠物基因分型的常用标记技术包括？

A.SNP分型

B.STR分型

C.MLST分型

D.基因芯片分析

E.毛细管电泳检测

4.DNA样本保存不当可能导致哪些问题？

A.DNA降解

B.甲基化修饰改变

C.污染引入

D.重复序列扩增

E.蛋白质残留

5.基因鉴定报告中需包含哪些关键信息？

A.个体基因型

B.等位基因频率

C.亲缘关系分析

D.基因缺陷检测

E.市场推广建议

三、判断题（共10题，每题1分，共10分）

题目：

1.PCR扩增时，退火温度越高，特异性越好。（×）

2.Sanger测序法适用于高通量基因测序。（×）

3.宠物DNA提取时，氯仿可以去除蛋白质杂质。（√）

4.SNP分型主要用于个体识别，STR分型主要用于遗传病检测。（×）

5.基因测序数据中，N值越高，数据质量越好。（×）

6.宠物基因鉴定报告需包含样本来源和检测方法。（√）

7.PCR反应体系中，dNTPs是合成DNA的原料。（√）

8.KASP检测技术基于荧光标记的等温扩增。（×）

9.DNA样本保存时，4℃比-20℃更利于长期保存。（×）

10.基因分型结果可直接用于宠物市场定价。（×）

四、简答题（共5题，每题5分，共25分）

题目：

1.简述宠物DNA提取的基本步骤及其原理。

2.解释PCR扩增中引物二聚体形成的危害及避免方法。

3.描述Sanger测序法的基本原理及其应用场景。

4.列举三种用于宠物基因分型的标记技术及其特点。

5.说明基因鉴定报告中需重点关注哪些信息。

五、论述题（共2题，每题10分，共20分）

题目：

1.分析宠物基因鉴定实验中可能出现的常见问题及其解决方法。

2.结合行业现状，探讨宠物基因鉴定技术的未来发展趋势及市场应用前景。

答案与解析

一、单选题

1.A热煮沸法不适用于宠物DNA提取，通常用于RNA提取或蛋白质变性。

2.D引物设计应避免与模板其他区域结合，而非要求高度同源性。

3.ASanger测序基于荧光标记的末端片段长度测序。

4.D等位基因特异性PCR主要用于基因诊断，而非分型。

5.B-20℃避光干燥最利于DNA长期保存。

6.D报告不应包含市场推广建议。

7.BdNTPs是