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单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的发明者是（）

A.KaryMullisB.WatsonC.CrickD.Meselson

答案：A

解析：PCR技术是由美国科学家KaryMullis于1983年发明的，他因此获得1993年诺贝尔化学奖。

2.PCR反应体系中，TaqDNA聚合酶的作用是（）

A.解开双链DNAB.合成引物C.延伸DNA链D.识别模板

答案：C

解析：TaqDNA聚合酶能以dNTP为原料，在引物的引导下，沿着模板DNA链延伸合成新的DNA链。

3.下列哪种物质不是PCR反应所必需的（）

A.dNTPB.引物C.RNA聚合酶D.TaqDNA聚合酶

答案：C

解析：PCR反应需要dNTP作为合成DNA的原料，引物引导DNA合成，TaqDNA聚合酶进行链延伸，而RNA聚合酶不是必需的。

4.PCR反应的退火温度一般根据（）来确定

A.模板DNA长度B.引物长度和碱基组成C.TaqDNA聚合酶活性D.dNTP浓度

答案：B

解析：引物长度和碱基组成决定了引物与模板结合的特异性和稳定性，退火温度主要依据此来设定，以保证引物能准确结合模板。

5.在PCR反应中，引物的浓度一般为（）

A.0.1-0.5μmol/LB.1-5μmol/LC.10-50μmol/LD.100-500μmol/L

答案：A

解析：引物浓度过高易导致非特异性扩增，过低则影响扩增效率，一般0.1-0.5μmol/L较为合适。

6.PCR产物的特异性主要取决于（）

A.模板DNA的纯度B.TaqDNA聚合酶的质量C.引物的特异性D.dNTP的质量

答案：C

解析：引物与模板的特异性结合决定了扩增产物的特异性，如果引物特异性不好，容易扩增出非目标片段。

7.以下哪种方法可用于检测PCR产物的大小（）

A.分光光度计B.凝胶电泳C.酶标仪D.高效液相色谱

答案：B

解析：凝胶电泳可以根据DNA片段在电场中的迁移速度不同，分离不同大小的DNA片段，从而检测PCR产物大小。

8.PCR反应中，变性温度一般为（）

A.55-65℃B.72℃C.90-95℃D.100℃

答案：C

解析：变性温度需足够高以解开双链DNA，一般90-95℃能使模板DNA充分变性为单链。

9.实时荧光定量PCR技术中，荧光信号的产生与（）有关

A.DNA合成量B.引物浓度C.TaqDNA聚合酶活性D.模板DNA浓度

答案：A

解析：实时荧光定量PCR中，荧光信号强度与PCR过程中DNA的合成量成正比，通过检测荧光信号来定量分析起始模板量。

10.下列关于PCR反应体系的说法，错误的是（）

A.反应体系应保持无菌B.各种成分的比例要准确C.反应体系体积越大越好D.需在冰上配置部分试剂

答案：C

解析：反应体系体积过大可能导致反应成分浓度改变等问题，并非越大越好，其他选项说法均正确。

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本成分包括（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.TaqDNA聚合酶E.缓冲液

答案：ABCDE

解析：这些都是PCR反应必不可少的基本成分，模板是扩增的起始依据，引物引导合成，dNTP提供原料，TaqDNA聚合酶进行延伸，缓冲液维持反应环境。

2.影响PCR反应的因素有（）

A.温度B.引物设计C.dNTP浓度D.模板质量E.酶的用量

答案：ABCDE

解析：温度的各个阶段设置影响反应进程，引物设计决定特异性，dNTP浓度影响合成，模板质量和酶用量也对扩增效果有重要影响。

3.PCR技术可应用于（）

A.基因克隆B.疾病诊断C.亲子鉴定D.物种鉴定E.突变检测

答案：ABCDE

解析：PCR技术在这些领域都有广泛应用，如通过扩增特定基因进行克隆，检测相关基因用于疾病诊断、亲子鉴定、物种鉴定及突变检测等。

4.实时荧光定量PCR技术的优点包括（）

A.灵敏度高B.特异性强C.可实现定量分析D.操作简便E.无需电泳检测

答案：ABCDE

解析：实时荧光定量PCR能实时监测荧光