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细胞培养技术员创新能力考核标准

一、单选题（共10题，每题3分，总分30分）

1.在进行细胞传代时，为了提高细胞活性，应优先选择哪种培养基成分调整pH值？

A.HEPES缓冲液

B.CO2

C.NaHCO3

D.Tris

2.当细胞出现接触抑制时，最有效的处理方法是？

A.增加培养基中血清浓度

B.降低培养箱温度

C.更换新鲜培养基

D.减少细胞接种密度

3.在制备单克隆抗体时，杂交瘤细胞筛选常用的筛选剂是？

A.伊红美蓝染液

B.HAT培养基

C.MTT溶液

D.结晶紫

4.对于贴壁细胞，常用的胰蛋白酶消化浓度为？

A.0.25%

B.0.5%

C.1.0%

D.2.0%

5.细胞冻存时，常用的保护剂是？

A.甘露醇

B.葡萄糖

C.蔗糖

D.乳糖

6.在进行细胞计数时，使用血球计数板的优势是？

A.操作简单

B.结果准确

C.适用于所有细胞类型

D.以上都是

7.细胞培养基中，L-谷氨酰胺的作用是？

A.提供能量

B.促进细胞增殖

C.维持pH稳定

D.以上都是

8.当细胞出现形态异常时，可能的原因是？

A.培养基污染

B.细胞营养不足

C.温度不适宜

D.以上都是

9.在进行细胞实验时，无菌操作的要点不包括？

A.手部消毒

B.工作台面消毒

C.培养基无菌过滤

D.口鼻遮挡

10.细胞凋亡的典型特征是？

A.细胞膜破裂

B.DNA片段化

C.细胞体积增大

D.细胞外溢

二、多选题（共5题，每题4分，总分20分）

1.细胞培养过程中，常见的污染类型包括？

A.细菌污染

B.真菌污染

C.病毒污染

D.细胞交叉污染

2.在进行细胞冻存时，正确的步骤包括？

A.缓慢降温

B.快速冷冻

C.使用DMSO作为保护剂

D.直接置于-80℃保存

3.细胞培养基中，常见的添加剂包括？

A.血清

B.活性炭

C.丝裂原

D.胰蛋白酶

4.细胞传代过程中，需要注意的事项包括？

A.细胞接种密度

B.培养基更换频率

C.温度控制

D.pH值监测

5.细胞实验中，常用的检测方法包括？

A.MTTassay

B.流式细胞术

C.Westernblot

D.光学显微镜观察

三、判断题（共10题，每题2分，总分20分）

1.细胞培养过程中，CO2浓度应维持在5%。（√）

2.细胞冻存时，直接置于液氮中保存可以避免细胞损伤。（×）

3.细胞培养基中的抗生素可以长期添加以防止污染。（×）

4.细胞接触抑制是正常生理现象。（√）

5.细胞计数时，血球计数板的计数区域分为四个大方格。（√）

6.细胞培养基中的L-谷氨酰胺可以替代其他氨基酸。（×）

7.细胞凋亡时，细胞膜完整性被破坏。（×）

8.细胞实验中，无菌操作可以完全避免污染。（×）

9.细胞冻存时，保护剂DMSO的浓度通常为5-10%。（√）

10.细胞传代时，胰蛋白酶消化时间应控制在1-2分钟。（√）

四、简答题（共5题，每题6分，总分30分）

1.简述细胞培养基的基本成分及其作用。

2.如何判断细胞是否出现污染？常见的污染类型有哪些？

3.细胞冻存时，为什么需要使用保护剂？常用的保护剂有哪些？

4.简述细胞凋亡与坏死的区别。

5.在进行细胞实验时，如何确保无菌操作？

五、论述题（共2题，每题10分，总分20分）

1.结合实际工作，论述细胞培养过程中如何提高细胞活性。

2.分析细胞培养基对细胞生长的影响，并提出改进培养基的方案。

答案与解析

一、单选题

1.C

解析：NaHCO3在CO2存在下可以缓冲培养基的pH值，是细胞培养中最常用的pH调节剂。

2.D

解析：减少细胞接种密度可以避免细胞过早接触抑制，从而提高细胞活性。

3.B

解析：HAT培养基通过选择性地杀死未杂交的HGPRT缺陷型细胞，筛选出杂交瘤细胞。

4.A

解析：0.25%胰蛋白酶是常用的细胞消化浓度，可以有效地消化细胞间质，同时避免过度消化。

5.A

解析：甘露醇是常用的细胞冻存保护剂，可以降低细胞内冰晶形成，减少细胞损伤。

6.D

解析：血球计数板操作简单、结果准确，且适用于多种细胞类型，是细胞计数的首选工具。

7.D

解析：L-谷氨酰胺是细胞生长必需的氨基酸，可以提供能量、促进细胞增殖，并维持pH稳定。

8.D

解析：细胞形态异常可能由培养基污染、营养不足或温度不适宜等多种原因引起。

9.D

解析：口鼻遮挡可以防止飞沫污染，手部消毒、工作台面消毒和培养基无菌过滤都是无菌操作的重要步骤。

10.B

解析：DNA片段化是细胞凋亡的典型特征，而