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双委夜蛾性信息素与气味结合蛋白基因:解析与探索
一、引言
1.1研究背景与目的
双委夜蛾(Athetisdissimilis)作为近年来在我国新出现的一种重要农业害虫,自2012年在山东省首次被发现以来,其危害范围正逐年扩大,目前在河南、陕西、安徽等地均有分布。该害虫食性极为广泛,除了对玉米造成严重危害外,还会侵害小麦、大豆、花生、甘薯等多种农作物。在玉米田中,双委夜蛾幼虫通常隐匿于田间的枯枝落叶、自生麦苗或杂草之下,以玉米幼苗的茎基部为食,严重时会导致玉米缺苗断垄,极大地影响玉米的产量和质量,给农业生产带来了巨大的经济损失。
昆虫在长期的进化过程中,形成了高度灵敏和特异的化学通讯系统,性信息素通讯是其中的重要组成部分。性信息素由昆虫某一性别个体分泌,能被同种异性个体感知并引发特定行为反应,在昆虫的求偶、交配等生殖活动中起着关键作用。对于双委夜蛾而言,明确其性信息素的成分,有助于深入了解其生殖行为和种群动态,为开发基于性信息素的绿色防控技术提供理论基础。
气味结合蛋白(OdorantBindingProteins,OBPs)在昆虫嗅觉识别过程中扮演着重要角色。它们能够特异性地结合外界的气味分子,将其运输到嗅觉受体,从而启动昆虫的嗅觉信号传导通路。研究双委夜蛾的气味结合蛋白基因,对于揭示其嗅觉感受机制,从分子层面理解双委夜蛾对环境气味的识别和响应具有重要意义。
本研究旨在通过对双委夜蛾性信息素的鉴定,明确其性信息素的主要成分及比例;同时,克隆双委夜蛾的气味结合蛋白基因,并分析其在不同组织和发育阶段的表达谱,为深入了解双委夜蛾的化学通讯机制提供理论依据,为开发针对双委夜蛾的绿色、高效防控技术奠定基础。
1.2国内外研究现状
在双委夜蛾性信息素鉴定方面,王鑫辉等人利用气相色谱-质谱联用仪对双委夜蛾未交配雌蛾性腺提取物进行分析,成功分离出顺-9-十四碳烯醇、顺-7-十六碳烯醛和顺-11-十四碳烯乙酸酯3个组分,并发现这3种组分以1∶1∶1的比例混合时对雄蛾的引诱活性最佳。一项关于双委夜蛾性诱剂的研究表明,该性诱剂对双委夜蛾雄虫的引诱效率高达90%,具有显著的引诱效果。然而,目前对于双委夜蛾性信息素的研究仍存在一定局限性,如对性信息素的释放规律、田间应用效果的稳定性等方面的研究还不够深入。
在双委夜蛾气味结合蛋白基因研究领域,闫祺等基于双委夜蛾触角转录组数据,克隆获得了3个信息素结合蛋白基因(AdisPBP1、AdisPBP2、AdisPBP3),并分析了它们在雌雄成虫不同组织中的表达谱,发现这3个基因均仅在雌雄虫触角中高表达,且AdisPBP1在雄性触角中的表达量显著高于雌性触角。宋月芹等对双委夜蛾气味结合蛋白AdisOBP6进行了原核表达、抗体制备及表达谱分析,证实AdisOBP6在双委夜蛾精巢中大量表达,成虫羽化后表达量达到高峰。不过,当前对于双委夜蛾气味结合蛋白基因的功能研究还相对较少,其在双委夜蛾嗅觉识别过程中的具体作用机制尚不完全清楚。
1.3研究意义
从理论层面来看,本研究对双委夜蛾性信息素的鉴定和气味结合蛋白基因的克隆与表达谱分析,有助于深入揭示昆虫的化学通讯机制,丰富昆虫化学生态学的理论知识。通过研究双委夜蛾性信息素的成分、释放规律以及气味结合蛋白基因在嗅觉识别中的作用,能够进一步理解昆虫在复杂环境中如何通过化学信号进行信息交流和行为调控,为昆虫嗅觉生物学的发展提供新的研究思路和数据支持。
在实践应用方面,明确双委夜蛾的性信息素成分,可开发出高效的性诱剂,用于双委夜蛾的监测和诱捕,实现对其种群数量的有效控制。深入了解气味结合蛋白基因的功能,有望为开发新型的昆虫行为调节剂提供潜在的分子靶标,通过干扰双委夜蛾的嗅觉识别过程,阻断其与环境气味的正常通讯,从而达到防治害虫的目的。这些绿色防控技术的开发和应用,能够减少化学农药的使用,降低农药残留对环境和农产品质量安全的影响,保护生态平衡,促进农业的可持续发展,对于保障粮食安全和生态环境具有重要意义。
二、双委夜蛾性信息素鉴定
2.1材料与方法
2.1.1实验材料
双委夜蛾采自河南郑州地区玉米田,将采集到的双委夜蛾带回实验室,在温度(25±1)℃、相对湿度(70±5)%、光周期16L∶8D的条件下,用人工饲料饲养多代。人工饲料配方参照赵楠等的研究,主要包括玉米粉、黄豆粉、小麦胚芽粉、酵母粉、山梨酸钾、琼脂、维他命、食用植物油和蒸馏水等。成虫羽化后,将雌雄蛾分开饲养,提供10%的蜂蜜水作为补充营养。
实验用到的主要仪器设备有气相色谱-质谱联用仪(GC-MS,ThermoScientificTRACE1310-ISQ7000)、气相色谱-触角
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