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肝脏γδT细胞对CCl4诱导肝纤维化进程的抑制作用及机制探究

一、引言

1.1研究背景

肝脏，作为人体最重要的代谢和解毒器官之一，对维持机体正常生理功能起着不可或缺的作用。肝纤维化（liverfibrosis）作为各种慢性肝病发展为肝硬化的必经阶段，严重威胁着人类的健康，给全球公共卫生带来了沉重负担。肝纤维化的主要特征为细胞外基质（ECM）在肝脏内过度沉积。在中国，慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是导致肝纤维化的首要原因，约占全部病例的50%-60%。长期的HBV感染会引发持续的肝脏炎症反应，刺激肝星状细胞（HSC）活化，使其转化为肌成纤维细胞样细胞，大量合成和分泌ECM，如胶原蛋白、纤连蛋白等。除了病毒感染，酒精性肝病也是导致肝纤维化的重要因素之一。长期过量饮酒会使肝脏代谢功能紊乱，产生大量的乙醛等有害物质，损伤肝细胞，引发炎症和纤维化。据统计，每日饮酒量超过60克，持续10年以上，发生肝纤维化的风险将显著增加。除此之外，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）、自身免疫性肝病等也在肝纤维化的发病中占据一定比例。肝纤维化若未能得到及时有效的治疗，病情将逐渐进展，最终发展为肝硬化，导致肝脏功能严重受损，引发一系列并发症，如门静脉高压、腹水、肝性脑病等，甚至增加肝癌的发生风险。

为了深入研究肝纤维化的发病机制、寻找有效的治疗方法，科研人员建立了多种肝纤维化动物模型。其中，四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化模型因其操作简便、成本相对较低、重复性好等优点，成为了目前应用最为广泛的模型之一。CCl4是一种无色透明的挥发性液体，具有强烈的肝毒性。进入体内后，CCl4通过细胞色素P450系统在肝脏中代谢，产生自由基，如三氯甲基自由基（?CCl3）和过氧化三氯甲基自由基（?OOCCl3）。这些自由基极为活泼，能够与肝细胞内的生物大分子，如脂质、蛋白质和核酸等发生反应，导致脂质过氧化和细胞死亡，进而引起肝细胞损伤和炎症反应。肝脏的损伤和炎症反应会激活肝星状细胞（HSCs），这些静息的HSCs在受到刺激后，会发生表型转化，转变为活化的肌成纤维细胞样细胞。活化的HSCs开始大量增殖，并产生大量的胶原和其他细胞外基质蛋白，如Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白和层粘连蛋白等，这些物质在肝脏内过度沉积，最终导致纤维化的形成。

在肝脏的免疫系统中，γδT细胞虽然数量相对较少，却发挥着关键作用，具有独特的免疫调节功能，可以通过多种方式调控机体的免疫应答和免疫失衡相关疾病的进展。γδT细胞是一类在人和小鼠中较为稀少的T细胞亚群，占据了总T细胞的1-10%左右。相较于αβT细胞，γδT细胞具有独特的免疫识别特性，它们能够直接识别多种抗原，包括非肽类抗原、磷酸抗原和热休克蛋白等，无需抗原提呈细胞（APC）的加工和提呈，从而能够快速启动免疫应答。在肝脏中，γδT细胞通过抑制NK细胞、NKT细胞等其他细胞的免疫应答，减少了对肝细胞的损害，从而具有了保护肝细胞的作用。此外，γδT细胞还可以分泌多种细胞因子，如干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-17（IL-17）等，参与调节肝脏的免疫微环境，影响肝脏疾病的发生和发展。越来越多的研究表明，γδT细胞在肝脏疾病，如乙型肝炎、丙型肝炎和肝癌等中发挥着重要作用，其数量和功能的改变与疾病的进程和预后密切相关。然而，γδT细胞在CCl4诱导的肝纤维化进程中的作用及机制，目前仍尚不明确。

1.2研究目的与意义

本研究旨在深入探讨肝脏γδT细胞对CCl4诱导的肝纤维化进程的影响及其潜在机制，具体目的如下：首先，通过构建CCl4诱导的肝纤维化动物模型，研究γδT细胞缺失或过继转输对肝纤维化程度的影响，明确γδT细胞在肝纤维化进程中的作用；其次，探究γδT细胞在纤维化肝脏中的募集机制，以及其与肝星状细胞（HSCs）之间的相互作用，揭示γδT细胞抑制肝纤维化的细胞学机制；再者，分析不同γδT细胞亚群，如分泌IFNγ的γδT细胞亚群（γδT1）和分泌IL-17的γδT细胞亚群（γδT17）在抗纤维化中的作用差异，为进一步阐明γδT细胞的抗纤维化机制提供理论依据；最后，研究γδT细胞对肝脏内自然杀伤细胞（NK细胞）活性的调节作用及其机制，明确γδT细胞在肝脏免疫调节网络中的地位。

本研究具有重要的理论和实际意义。从理论层面来看，深入了解肝脏γδT细胞抑制CCl4诱导肝纤维化进程的机制，将有助于进一步完善肝纤维化的发病机制理论，为肝脏疾病的免疫学研究提供新的视角和思路。γδT细胞作为肝脏免疫系统的重要组成部分，其在肝纤维化中的作用机制研究，将丰富我们对肝脏免疫调节网络的认识，有助于揭示肝脏疾