3.1重组DNA技术的基本工具.pptxVIP

第1节重组DNA技术的基本工具

“分子手术刀”“分子缝合针”“分子运输车”重组DNA技术的基本工具剪接运准确切割DNA分子将DNA片段连接起来将体外重组好的DNA分子导入受体细胞

一、限制性内切核酸酶（简称限制酶）——“分子手术刀”主要是原核生物来源种类数千种限制酶不是一种酶，而是一类酶作用特点（1）识别双链DNA分子特定核苷酸序列（2）使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。识别序列长度大多数为6个核苷酸，少数为4~8个或其他数量的核苷酸。酶的专一性TGCCGTAA5353

401“分子手术刀”----限制性内切核酸酶拓展：限制酶的名字的由来P72EcoRⅠ：大肠杆菌（Escherichiacoli）R型菌株中分离出的第一个限制酶；SmaⅠ：粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens）中分离出的第一个限制酶。EcoRⅠ种加词头两个字母菌株型号数字表示分离出来的第几种限制酶属名首字母

GAATTCCTTAAG5’3’3’5’中心轴线GCTTAAAATTCG中心轴线两侧切开黏性末端EcoRⅠ5.作用结果：产生DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种形式。（1）EcoRⅠ限制酶能特异性识别序列（5’→3’方向），在识别序列的中