林木根际解磷菌有机酸分泌基因启动子功能验证双荧光素酶开源试题库及答案.docVIP

林木根际解磷菌有机酸分泌基因启动子功能验证双荧光素酶开源试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶报告基因系统中，常用的萤火虫荧光素酶基因是？

A.luc+B.luc2C.luxD.gfp

答案：B

2.验证基因启动子功能时，构建载体一般不包含？

A.启动子片段B.荧光素酶基因C.抗性基因D.终止子

答案：D

3.提取解磷菌DNA常用的方法是？

A.酚氯仿法B.离子交换法C.亲和层析法D.凝胶过滤法

答案：A

4.用于转化大肠杆菌的常用化学试剂是？

A.氯化钙B.氯化钠C.氯化镁D.硫酸钠

答案：A

5.检测荧光素酶活性的仪器是？

A.酶标仪B.离心机C.电泳仪D.天平

答案：A

6.筛选重组子常用的方法是？

A.蓝白斑筛选B.梯度稀释法C.平板划线法D.穿刺接种法

答案：A

7.构建载体过程中，连接目的片段和载体的酶是？

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.反转录酶D.蛋白酶

答案：B

8.培养解磷菌常用的培养基是？

A.LB培养基B.牛肉膏蛋白胨培养基C.高氏一号培养基D.马丁氏培养基

答案：A

9.启动子功能验证实验中，阴性对照是？

A.只含荧光素酶基因载体B.含启动子和荧光素酶基因载体C.无菌水D.空载体

答案：D

10.荧光素酶的作用底物是？

A.底物AB.底物BC.荧光素D.葡萄糖

答案：C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶报告基因系统的优点有？

A.灵敏度高B.线性范围宽C.检测快速D.不受其他物质干扰

答案：ABC

2.构建启动子荧光素酶报告载体需要的工具酶有？

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.碱性磷酸酶D.末端转移酶

答案：AB

3.解磷菌有机酸分泌相关基因启动子研究的意义在于？

A.了解解磷机制B.改良林木生长C.开发生物肥料D.增加土壤微生物多样性

答案：ABC

4.筛选解磷菌的方法有？

A.钼锑抗比色法B.溶磷圈法C.离子交换法D.荧光定量法

答案：AB

5.影响荧光素酶活性检测的因素有？

A.细胞裂解程度B.反应时间C.温度D.底物浓度

答案：ABCD

6.进行基因克隆时，引物设计需要考虑的因素有？

A.引物长度B.碱基组成C.引物Tm值D.引物特异性

答案：ABCD

7.常用的基因载体有？

A.质粒B.噬菌体C.病毒载体D.人工染色体

答案：ABC

8.验证启动子功能实验中，需要设置的对照有？

A.阳性对照B.阴性对照C.空白对照D.实验对照

答案：AB

9.检测解磷菌有机酸分泌量的方法有？

A.高效液相色谱法B.酸碱滴定法C.分光光度法D.重量法

答案：ABC

10.基因表达调控包括哪些水平？

A.转录水平B.转录后水平C.翻译水平D.翻译后水平

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶报告基因系统只能用于验证启动子功能。（×）

2.限制性内切酶切割DNA后产生的末端都是粘性末端。（×）

3.解磷菌一定能分泌有机酸。（×）

4.荧光素酶活性越高，说明启动子活性越强。（√）

5.构建载体时，目的片段和载体的连接比例没有要求。（×）

6.大肠杆菌感受态细胞制备过程中，温度对转化效率无影响。（×）

7.启动子是基因转录起始的部位。（√）

8.检测荧光素酶活性前，细胞不需要裂解处理。（×）

9.重组子筛选过程中，蓝斑一定是阳性克隆。（×）

10.解磷菌在任何土壤中都能发挥解磷作用。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述双荧光素酶报告基因系统验证启动子功能的原理。

答案：将待验证启动子与荧光素酶基因构建到载体上，转染细胞后，启动子驱动荧光素酶表达，通过检测荧光素酶活性反映启动子活性，因荧光素酶催化底物发光，活性与启动子活性相关。

2.构建启动子荧光素酶报告载体的基本步骤。

答案：首先提取解磷菌基因组DNA，设计引物扩增启动子片段；用限制性内切酶分别酶切启动子片段和载体；再用DNA连接酶连接二者；最后转化大肠杆菌筛选阳性克隆，获得重组载体。

3.解磷菌有机酸分泌基因启动子功能验证实验中，阳性对照和阴性对照的作用。

答案：阳性对照可验证实验系统的有效性，若阳性对照有预期结果，说明实验操作和检测方法正确；