林木干旱抗氧化酶网络关键节点基因沉默 VIGS 验证完整代码试题库及答案.docVIP

林木干旱抗氧化酶网络关键节点基因沉默VIGS验证完整代码试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.VIGS技术中常用的载体是（）

A.Ti质粒B.pTRVC.pUC19D.pBR322

2.以下哪种不是干旱胁迫下抗氧化酶（）

A.SODB.PODC.CATD.ATP酶

3.基因沉默效果检测常采用（）

A.测序B.WesternblotC.qRT-PCRD.酶切

4.构建VIGS载体的第一步是（）

A.目的基因扩增B.载体酶切C.连接反应D.转化

5.用于VIGS的农杆菌菌株一般是（）

A.E.coliB.GV3101C.DH5αD.JM109

6.干旱处理林木时，常用的模拟干旱试剂是（）

A.蔗糖B.甘露醇C.葡萄糖D.麦芽糖

7.VIGS技术的优点不包括（）

A.快速B.高效C.永久性基因敲除D.操作相对简便

8.检测抗氧化酶活性通常采用（）

A.分光光度法B.荧光定量法C.凝胶成像法D.比色法

9.沉默基因的引物设计依据是（）

A.基因全长B.基因部分片段C.载体序列D.启动子序列

10.农杆菌介导VIGS转化林木细胞的方法是（）

A.浸泡法B.注射法C.电击法D.原生质体融合法

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.抗氧化酶网络包含的酶有（）

A.SODB.PODC.CATD.GR

2.VIGS技术涉及的步骤有（）

A.载体构建B.农杆菌转化C.植株接种D.效果检测

3.构建VIGS载体需要的工具酶有（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.反转录酶D.Taq酶

4.检测基因沉默效果的方法有（）

A.qRT-PCRB.WesternblotC.酶活性测定D.表型观察

5.林木干旱胁迫的生理响应包括（）

A.渗透调节B.气孔关闭C.抗氧化防御D.激素调节

6.选择用于VIGS的目的基因依据有（）

A.在抗氧化酶网络关键节点B.序列已知C.表达量高D.与干旱响应相关

7.农杆菌转化过程中影响转化效率的因素有（）

A.农杆菌浓度B.侵染时间C.植物材料状态D.培养温度

8.常见的VIGS载体元件有（）

A.病毒复制起始位点B.启动子C.多克隆位点D.终止子

9.干旱胁迫下林木抗氧化酶活性变化可能是（）

A.升高B.降低C.先升后降D.不变

10.进行VIGS实验时对照组设置方式有（）

A.空载转化B.不做处理C.转化无关基因D.正常浇水

三、判断题（每题2分，共10题）

1.VIGS技术可以完全敲除目的基因。（）

2.抗氧化酶活性在干旱胁迫下一定升高。（）

3.构建VIGS载体不需要考虑载体的大小。（）

4.农杆菌转化只适用于双子叶植物。（）

5.qRT-PCR只能检测基因转录水平变化。（）

6.干旱处理时间越长对林木影响越大。（）

7.所有基因都适合用VIGS技术进行沉默验证。（）

8.载体构建成功后可以直接用于农杆菌转化。（）

9.抗氧化酶网络中各酶之间相互独立发挥作用。（）

10.进行VIGS实验不需要设置重复。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述VIGS技术原理。

通过构建含有目的基因片段的病毒载体，导入植物细胞，病毒在植物体内复制和转录，引发植物的RNA干扰机制，从而使目的基因的表达受到抑制，实现基因沉默效果。

2.构建VIGS载体的关键步骤有哪些？

首先扩增目的基因片段，然后用限制性内切酶对载体和目的基因片段进行酶切，再通过DNA连接酶进行连接，之后进行转化和筛选阳性克隆。

3.如何检测VIGS基因沉默效果？

可以用qRT-PCR检测目的基因转录水平变化，Westernblot检测蛋白表达量变化，还能通过测定相关酶活性以及观察植株表型等方法来判断基因沉默效果。

4.简述干旱胁迫对林木抗氧化酶系统的影响。

干旱胁迫会激活林木抗氧化酶系统，使SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性改变，以清除过多的活性氧，维持细胞内氧化还原平衡，但长时间胁迫可能导致酶活性下降。