DB32-T 898-2006 蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定 高效液相色谱法.docxVIP

DB32T8982006蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了蛋品中乙氧酰胺苯甲酯残留量测定的高效液相色谱法。本标准适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋等禽蛋类产品中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定。

本标准的方法检出限为0.01mg/kg，定量限为0.03mg/kg。

2原理

试样中的乙氧酰胺苯甲酯用乙腈提取，经正己烷液液分配净化，去除脂肪等干扰物质，浓缩后用高效液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。

3试剂与材料

除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1乙腈：色谱纯

3.2正己烷：色谱纯

3.3甲醇：色谱纯

3.4无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后置于干燥器中备用

3.5乙氧酰胺苯甲酯标准品：纯度≥98.0%

3.6乙氧酰胺苯甲酯标准储备液：准确称取乙氧酰胺苯甲酯标准品10.0mg，用乙腈溶解并定容至100mL，配制成100μg/mL的标准储备液，4℃避光保存，有效期3个月。

3.7乙氧酰胺苯甲酯标准工作液：准确吸取适量标准储备液，用乙腈逐级稀释成0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL的标准工作液，现用现配。

4仪器与设备

4.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器

4.2分析天平：感量0.0001g和0.01g

4.3均质器：转速不低于10000r/min

4.4离心机：转速不低于4000r/min

4.5旋转蒸发仪

4.6氮吹仪

4.7涡旋混合器

4.8超声波清洗器

4.9固相萃取装置

4.10有机相滤膜：0.45μm

4.11容量瓶：10mL、25mL、50mL、100mL

4.12具塞离心管：50mL、100mL

4.13分液漏斗：250mL

5样品采集与保存

5.1样品采集

按GB/T9695.19规定的方法采集具有代表性的蛋品样品，采样量不少于500g。采样过程中应避免样品受到污染，采集的样品应置于清洁、干燥的样品容器中。

5.2样品保存

6分析步骤

6.1样品前处理

6.1.1提取

称取5.00g（精确至0.01g）均质后的蛋品样品于50mL具塞离心管中，加入20mL乙腈，涡旋混合2min，超声提取15min，以4000r/min离心5min。将上清液转移至100mL具塞离心管中。残渣用20mL乙腈重复提取一次，合并上清液。

6.1.2净化

向提取液中加入20mL正己烷，涡旋混合2min，以4000r/min离心5min，弃去上层正己烷层。向下层乙腈层中加入10g无水硫酸钠，涡旋混合1min，以4000r/min离心5min。将上清液转移至旋转蒸发瓶中，在40℃水浴中旋转蒸发至近干。用2mL乙腈溶解残渣，经0.45μm有机相滤膜过滤，待测。

6.2色谱条件

6.2.1色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm，或相当者

6.2.2流动相：乙腈水（70:30，V/V）

6.2.3流速：1.0mL/min

6.2.4柱温：30℃

6.2.5检测波长：254nm

6.2.6进样量：20μL

6.3测定

分别吸取标准工作液和试样溶液各20μL注入高效液相色谱仪进行测定，以保留时间定性，峰面积外标法定量。在上述色谱条件下，乙氧酰胺苯甲酯的保留时间约为8.5min。

7结果计算

试样中乙氧酰胺苯甲酯残留量按式（1）计算：

X=(A×c×V)/(A?×m)

式中：

X——试样中乙氧酰胺苯甲酯残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

A——试样溶液中乙氧酰胺苯甲酯的峰面积；

c——标准工作液中乙氧酰胺苯甲酯的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；

V——试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；

A?——标准工作液中乙氧酰胺苯甲酯的峰面积；

m——试样质量，单位为克（g）。

计算结果保留两位有效数字。

8精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。

9回收率

本标准方法的添加回收率范围为85%~110%。

10检验规则

10.1检验批

以同一生产日期、同一生产班次、同一品种的产品为一批。

10.2抽样方法

按GB/T9695.19规定的方法进行抽样，每批产品随机抽取不少于3个独立包装的样品，总量不少于500g。

10.3判定规则

10.3.1当所有样品的测定结果均低于本标准规定的检出限时，判定该批产品合格。

10.3.2当有样品的测定结果超过本标准规定的限量时，应重新抽取双倍样品进行复检。若复检结果仍有样品超过限量，则判定该批产品不合格。

11检验报告

a)检验样品名称、规格、批号、生产日期；

b)检验依据标准；

c)检验结果；

d)