检验仪器分析.PPTVIP

一、放射免疫技术概述（二）放射性活度测定方法1.放射免疫分析常用标记物：常用的标记物有放射γ射线和β射线的核素两大类。前者主要为131I、125I、57Cr和60Co；后者有14C、3H和32P。返回目录一、放射免疫技术概述（二）放射性活度测定方法2.放射性活度测定方法实际上就是进行放射性量测定的仪器。进行放射性量测定的仪器有两类。液体闪烁计数仪：用于检测β射线，如3H、32P、14C等晶体闪烁计数仪：用于检测γ射线，如125I、131I、57Cr等返回目录一、放射免疫技术概述（二）放射性活度测定方法2.放射性活度测定方法液体闪烁计数仪和晶体闪烁计数仪都是将射线（放射能）与闪烁体的作用转换成光脉冲（光能），然后用光电倍增管将光脉冲转换成电脉冲（电能），电脉冲在单位时间内出现的次数（即仪器记录的cmp值）反映了发出射线的频率，而电脉冲的电压幅度则反映了射线能量的高低。返回目录一、放射免疫技术概述（三）放射免疫分析的优点1.灵敏度高2.特异性强3.应用范围广4.操作简便返回目录一、放射免疫技术概述（三）放射免疫分析的缺点1.方法的局限性2.稳定性问题3.灵敏度问题4.测定结果中的问题5.生物安全问题返回目录二、液体闪烁计数器基本原理是依据射线与物质相互作用产生荧光效应首先是闪烁溶剂分子吸收射线能量成为激发态，再回到基态时将能量传递给闪烁体分子，闪烁体分子由激发态回到基态时，发出荧光光子。荧光光子被光电倍增管（PM）接收转换为光电子，再经倍增，在PM阳极获得大量电子，形成脉冲信号，输入后读分析电路形成数据信号，最后由计算机数据处理，求出待测抗原含量。返回目录液体闪烁计数器的结构和性能不断发展，目前多采用双管快符合对称系统多独立道分析，与微机联用，实现了高度的自动化。1．自动换样器2．基本电子学线路3．微机操作系统三、液体闪烁计数器基本结构返回目录四、液体闪烁计数器的使用1．样品-闪烁液反应体系建立样品和闪烁液按一定比例装入测量瓶，向光电倍增管提供光信号。（1）样品：根据样品的可溶性，进行不同的处理。（2）闪烁液：包括溶剂和溶质。（3）测量瓶：常用的测量瓶用低钾玻璃、聚乙烯等材料制作。返回目录2．猝灭样品、氧气、水及色素物质等加入闪烁体中，会使闪烁体的荧光效率降低，出射荧光光谱改变，从而使整个测量装置的测量效率降低的过程称为猝灭。为减小猝灭，可在闪烁液中通氮气或氩气驱氧；将样品pH值调至7左右，避免酸的猝灭作用；对卟啉、血红蛋白等着色样品进行脱色处理等。四、液体闪烁计数器的使用返回目录3．计数效率测定通常用于放射性的相对测量，即通过样品与标准样品的计数率的比较来测定样品。由于标准与待测样品的猝灭情况不同，就需要对猝灭进行必要的校正来求出每个具体样品相对于标准样品的实际计数效率。常用的校正法有内源法，外源法和道比法等目前广泛使用的是外部标准源校正法。四、液体闪烁计数器的使用返回目录五、放射免疫分析仪的应用1.各种激素2.微量蛋白质3.肿瘤标志物4.药物返回目录第五节免疫比浊分析仪一、免疫比浊技术概述二、免疫比浊分析仪工作原理与基本结构三、免疫比浊分析仪的保养四、免疫比浊分析的临床应用本节要点返回目录掌握免疫比浊分析仪的种类及工作原理熟悉免疫比浊分析的分类、基本原理及免疫比浊分析仪的临床应用了解免疫比浊分析仪的结构及保养学习目标第五节免疫比浊分析仪返回目录免疫比浊法（immunoturbidimetry）是利用可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当有光线通过时，就会产生折射或吸收，测定这种折射和吸收后的透射光或散射光，即可计算出样品的含量。一、免疫比浊技术概述返回目录（一）免疫比浊的分类一、免疫比浊技术概述免疫散射比浊法免疫胶乳浊度测定法速率散射比浊法免疫透射浊度测定法免疫透射比浊法终点散射比浊法返回目录（二）免疫比浊技术的主要特点1.稳定性好，敏感性高2.分析简便、快速3.能更好地避免标本之