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用显微镜观察人血细胞涂片的实验教案

一、实验名称

用显微镜观察人血细胞涂片

二、实验类型

验证性实验

三、实验目的

1.掌握光学显微镜的规范操作方法，特别是高倍镜的使用技巧。

2.识别红细胞、白细胞（重点区分中性粒细胞、淋巴细胞）及血小板的形态特征。

3.了解各类血细胞的正常形态、数量比例（大致范围）及其主要功能。

4.初步建立对人体血液微观世界的认识，培养观察能力和绘图能力。

四、实验原理

光学显微镜是利用凸透镜的成像原理，将微小物体放大到人眼可见的程度。人血涂片是将少量血液均匀涂抹在载玻片上，经过染色（如瑞氏染色或吉姆萨染色）后制成的标本。不同类型的血细胞因胞质内成分、细胞核结构的差异，会被染成不同的颜色，从而在显微镜下呈现出清晰可辨的形态特征。通过调节显微镜的焦距和放大倍数，可以观察到不同血细胞的细节。

五、实验材料与用具

1.实验材料：人血涂片标本（瑞氏染色或吉姆萨染色）。

2.实验用具：

*光学显微镜（学生用）

*载玻片，盖玻片（备用，若涂片未预先制备）

*擦镜纸

*纱布

*铅笔（HB、2B）

*绘图纸

*记录本

六、实验材料与用具准备

（此部分为教师准备，学生无需操作）

1.准备足量的、染色良好的人血涂片标本。

2.检查并调试好每台学生用光学显微镜，确保其性能良好，镜头清洁。

3.分发擦镜纸、纱布、铅笔、绘图纸及记录本。

七、实验步骤与方法

1.显微镜的取放与检查：

*右手握住显微镜镜臂，左手托住镜座，将显微镜从镜箱内取出，轻轻放置在实验台距边缘约一拳宽度、身体左前方的位置，略偏左。

*检查显微镜各部件是否完好，镜头是否清洁，转换器是否灵活，粗、细准焦螺旋是否能顺畅转动。

2.对光：

*转动转换器，使低倍物镜（如10×物镜）对准通光孔。注意物镜前端与载物台之间应保持适当距离。

*打开光圈（或调节遮光器至最大光圈），上升集光器（或使用凹面反光镜）。

*左眼注视目镜内，右眼睁开（便于观察和绘图），同时转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内，直至视野内呈现一个明亮、均匀的圆形视野。

3.放置血涂片标本：

*将人血涂片标本正面朝上放在载物台上，用压片夹压住涂片的两端。

*移动玻片，使涂片上的观察对象（血细胞分布均匀的区域）对准通光孔的中心。

4.低倍镜观察：

*从侧面注视物镜，同时转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降，直至低倍物镜接近玻片标本（约0.5-1厘米距离，注意不要触碰）。

*左眼注视目镜内，反向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢上升，直至视野中出现模糊的物像。

*略微转动细准焦螺旋，使视野中的物像更加清晰。

*观察血涂片的整体情况，移动玻片，寻找细胞分布均匀、结构清晰的区域作为观察重点。注意观察视野中数量最多的细胞类型。

5.高倍镜观察：

*在低倍镜下找到需要进一步放大观察的目标细胞（如单个形态清晰的红细胞、白细胞），并将其移至视野中央。

*转动转换器，平稳地换用高倍物镜（如40×物镜）。注意转换物镜时，眼睛应从侧面观察，防止物镜镜头碰撞玻片。

*转换高倍镜后，视野亮度可能会变暗，可通过调节光圈（增大光圈）或反光镜（换用凹面镜）来增加视野亮度。

*此时，切勿转动粗准焦螺旋！只需轻轻转动细准焦螺旋，即可使物像清晰。

*仔细观察红细胞的形态特征。

*寻找并观察白细胞。白细胞数量较少，形态较红细胞大，有细胞核。尝试区分几种不同类型的白细胞（重点观察中性粒细胞和淋巴细胞的形态差异，如细胞核的形状、细胞质中是否有颗粒等）。

*寻找血小板，它们体积较小，常成群分布在红细胞之间，形态不规则。

6.绘图与记录：

*选择典型的红细胞、一种或两种白细胞（如中性粒细胞、淋巴细胞）以及血小板，在绘图纸上分别绘制它们的形态图。

*绘图要求：形态准确，比例适当，用铅笔细线条勾勒，标注细胞名称及其主要结构（如细胞膜、细胞质、细胞核，若能观察到颗粒也可标注）。

*记录所观察到的各类血细胞的形态特点、数量多少（相对比例）以及在高倍镜下的大致放大倍数。

7.整理与清洁：

*观察完毕，转动粗准焦螺旋提升镜筒，取下玻片标本。

*转动转换器，使物镜镜头偏向两旁（不要正对通光孔），将镜筒降至最低处。

*关闭光圈，下降集光器（或恢复平面镜）。

*用擦镜纸轻轻擦拭目镜和物镜镜头（若有污渍），用纱布擦拭显微镜的镜身。

*将显微镜放回镜箱内，整理好实验台，清洁桌面。

八、注意事项

1.显微镜使用安全：取放显微镜时动作要轻，避免碰撞。严禁单手拎提显微镜。镜头是精密部件，严禁用手触摸或用纱布、纸巾等擦拭，只能用专用擦镜