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2025年新冠pcr检测培训试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.新冠病毒PCR检测中，以下哪项是聚合酶链式反应（PCR）的基本原料？

A.限制性内切酶

B.脱氧核糖核苷三磷酸（dNTPs）

C.反转录酶

D.质粒载体

答案：B

解析：PCR的基本原料包括模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶、dNTPs（脱氧核糖核苷三磷酸）和缓冲液。限制性内切酶用于基因切割，反转录酶用于逆转录过程（如RT-PCR），质粒载体是基因克隆工具，均非PCR基本原料。

2.新冠病毒核酸检测中，若使用荧光定量PCR（qPCR）技术，SYBRGreen染料的作用机制是？

A.特异性结合病毒RNA的特定序列

B.嵌入双链DNA发出荧光

C.与引物5’端标记的荧光基团结合

D.标记探针的淬灭基团

答案：B

解析：SYBRGreen是一种非特异性荧光染料，可嵌入双链DNA的小沟中发出荧光，荧光强度与双链DNA的数量正相关。特异性结合病毒序列的是探针（如TaqMan探针），而非SYBRGreen。

3.新冠病毒PCR检测实验室中，“试剂准备区”的核心操作要求是？

A.处理已扩增的PCR产物

B.进行核酸提取

C.配制不含模板的反应体系

D.完成扩增后产物分析

答案：C

解析：PCR实验室分区中，试剂准备区的主要功能是配制不含核酸模板的反应体系（如引物、酶、缓冲液等），需严格避免模板污染。核酸提取在“标本处理区”完成，扩增在“扩增区”，产物分析在“产物分析区”。

4.新冠病毒核酸检测标本（咽拭子）采集后，若无法立即检测，正确的保存条件是？

A.4℃保存不超过24小时，-20℃可长期保存

B.-80℃保存不超过48小时，室温可保存6小时

C.常温保存不超过12小时，4℃可保存72小时

D.-20℃保存不超过48小时，-80℃可长期保存

答案：A

解析：根据《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》，咽拭子标本采集后应尽快检测（2小时内）；若无法立即检测，4℃保存不超过24小时，-20℃或-80℃可长期保存（通常建议-80℃长期保存，-20℃可保存1个月）。

5.荧光定量PCR扩增曲线的“指数增长期”对应以下哪个阶段？

A.反应初始阶段，荧光信号无明显变化

B.荧光信号超过阈值，进入对数增长

C.酶活性下降，扩增速率减缓

D.产物积累达到平台，荧光信号不再增加

答案：B

解析：扩增曲线分为基线期（荧光信号低于阈值）、指数增长期（荧光信号对数增长）、平台期（产物积累饱和）。指数增长期是定量的关键阶段，Ct值（循环阈值）即在此阶段确定。

6.新冠病毒PCR检测中，内参基因（如人RNA酶P基因）的主要作用是？

A.提高扩增效率

B.验证标本采集和核酸提取的有效性

C.区分不同型别冠状病毒

D.降低假阳性率

答案：B

解析：内参基因（如人源管家基因）用于监测标本采集是否合格（是否含有人体细胞）、核酸提取过程是否有效（是否存在抑制物或操作失误）。若内参扩增失败，提示标本可能被污染、提取失败或存在抑制物，结果不可信。

7.以下哪种情况会导致PCR检测出现“假阴性”结果？

A.扩增仪温度校准偏差（退火温度过高）

B.实验室空气未消毒，存在扩增产物污染

C.引物与病毒变异株序列不匹配

D.加样时移液器交叉污染

答案：C

解析：假阴性指样本中存在病毒但未检测到。引物与病毒变异株序列不匹配（如病毒S基因突变导致引物结合失败）会导致扩增失败，出现假阴性。A选项退火温度过高可能降低扩增效率，但未必完全失败；B、D选项为污染导致假阳性。

8.新冠病毒PCR检测中，“扩增产物污染”属于以下哪类污染？

A.外源性污染（环境DNA污染）

B.内源性污染（标本间交叉污染）

C.试剂污染（反应体系含模板）

D.气溶胶污染（扩增产物形成的微滴）

答案：D

解析：扩增产物污染主要通过气溶胶传播（如开盖时产生的微滴），属于气溶胶污染。外源性污染指环境中其他DNA（如实验室其他病毒核酸），内源性污染指标本间交叉（如加样时溅出），试剂污染指反应体系本身含模板（如引物或酶被污染）。

9.荧光定量PCR仪的校准周期通常为？

A.每3个月

B.每6个月

C.每年

D.每2年

答案：C

解析：根据《医学实验室质量和能力认可准则》（ISO15189），PCR仪等关键设备需每年进行校准（包括温度均匀性、荧光信号准确性等），确保检测结果的准确性和重复性。

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