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清热解毒“药对”对CAC小鼠结肠DNA甲基化/去甲基化酶动态变化的干预机制研究

一、引言

1.1研究背景

结肠炎相关结肠癌（Colitis-associatedcolorectalcancer，CAC）作为一种由肠道慢性炎症发展而来的结直肠恶性肿瘤，是溃疡性结肠炎等肠道炎症性疾病最常见且严重的并发症之一。近年来，随着生活方式的改变和环境因素的影响，CAC的发病率呈逐渐上升趋势，严重威胁着人类的健康。据统计，全球范围内CAC的发病率在过去几十年间持续增长，给患者家庭和社会带来了沉重的经济负担与精神压力。例如，在欧美一些国家，CAC的发病率已位居消化系统恶性肿瘤的前列；在中国，其发病率也呈现出明显的上升态势，且发病年龄逐渐趋于年轻化。

DNA甲基化与去甲基化作为重要的表观遗传修饰方式，在CAC的发生发展过程中扮演着关键角色。正常生理状态下，DNA甲基化模式精确调控基因的表达，维持细胞的正常功能和稳态。然而，在CAC发生时，DNA甲基化与去甲基化状态会出现异常改变。一方面，基因组整体的低甲基化现象较为普遍，这可能导致癌基因的激活，如Ras、MDR1、NT、cmyc等癌基因的低甲基化可使其表达上调，进而促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。另一方面，部分基因启动子区域的CpG岛呈现高甲基化状态，使得抑癌基因如p16INK4a、HPP1/TPEF、RIZ1、HLTF等的表达受到抑制，无法正常发挥抑制肿瘤的作用。这种DNA甲基化与去甲基化的失衡，破坏了基因表达的正常调控网络，为CAC的发生发展创造了条件。

清热解毒法是中医治疗肿瘤的重要法则之一，清热解毒“药对”作为其具体应用形式，在临床实践和实验研究中均展现出一定的抗CAC潜力。许多清热解毒类中药及药对能够抑制肿瘤细胞的增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，调节机体免疫功能，从而发挥抗CAC的作用。例如，藤梨根与水杨梅根组成的药对，在体外实验中能够显著抑制结肠癌细胞的生长，并诱导其凋亡；在体内实验中，可有效抑制小鼠移植瘤的生长，延长荷瘤小鼠的生存期。然而，目前对于清热解毒“药对”干预CAC过程中DNA甲基化/去甲基化酶动态变化的研究仍相对较少，其作用机制尚未完全明确。深入探究这一领域，有助于进一步揭示CAC的发病机制，为临床治疗提供更精准的理论依据和治疗策略。

1.2研究目的与意义

本研究旨在通过观察CAC小鼠结肠组织中DNA甲基化/去甲基化酶的动态变化，探讨其在CAC发生发展过程中的作用机制，并研究清热解毒“药对”对这些酶动态变化的干预效果，明确清热解毒“药对”抗CAC的作用靶点和分子机制。

研究DNA甲基化/去甲基化酶在CAC小鼠结肠中的动态变化，能够深入了解CAC的表观遗传调控机制，为揭示CAC的发病机制提供新的视角和理论依据。这有助于我们从分子层面理解疾病的发生发展过程，为早期诊断和预防CAC提供潜在的生物标志物。

探究清热解毒“药对”对CAC小鼠结肠DNA甲基化/去甲基化酶动态变化的干预作用，能够明确其抗CAC的作用靶点和分子机制。这不仅有助于丰富中医药治疗CAC的理论内涵，还为开发基于清热解毒“药对”的新型抗CAC药物提供科学依据，推动中医药在肿瘤治疗领域的创新发展。

清热解毒“药对”作为中医药的重要组成部分，具有多靶点、低毒副作用等优势。本研究的成果有望为临床治疗CAC提供新的治疗策略和方法，提高CAC的治疗效果，改善患者的生活质量，减轻患者的痛苦和经济负担，具有重要的临床应用价值和社会意义。

二、文献综述

2.1DNA甲基化与去甲基化研究进展

2.1.1DNA甲基化机制与相关酶

DNA甲基化是在DNA甲基转移酶（DNAmethyltransferase，DNMT）的催化作用下，以S-腺苷甲硫氨酸（SAM）为甲基供体，将甲基基团共价结合到DNA分子中特定碱基上的化学修饰过程。在哺乳动物中，这种修饰主要发生在CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位上，形成5-甲基胞嘧啶（5-mC）。

DNA甲基转移酶主要包括DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L等。DNMT1是维持性甲基转移酶，对DNA甲基化模式的稳定维持至关重要。在DNA复制过程中，DNMT1能够识别半甲基化的DNA双链，并将甲基基团添加到新合成链的相应胞嘧啶上，使得DNA甲基化模式得以精确地传递给子代DNA。例如，在细胞分裂过程中，DNMT1确保每个子代细胞都继承了与亲代细胞相同的DNA甲基化标记，从而维持细胞的特性和功能稳定。研究发现，DNMT1的缺失会导致基因组整体