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基于电化学传感技术的肠道致病菌检测新方法探索与实践

一、引言

1.1研究背景

肠道致病菌是一类能够引发消化道感染及重大公共卫生事件的微生物，常见的有大肠杆菌、沙门氏菌、弯曲菌等。这些病菌在全球范围内广泛传播，每年导致大量人员感染，严重威胁人类健康，并造成巨大的经济损失。例如，大肠杆菌作为人及各种动物肠道中的常居菌，随粪便排出后广泛散播于自然界，部分类型的大肠杆菌感染人体后，可引发腹膜炎、出血性肠炎、胆囊炎、阑尾炎和尿道炎等疾病，严重时甚至危及生命。而沙门氏菌在世界各国的细菌性食物中毒案例中，常常位居榜首。肠道致病菌性感染已成为全球公共卫生领域亟待解决的关键问题。

及时、准确地检测肠道致病菌对于疾病预防和控制至关重要。传统的检测方法如菌落计数法、PCR法、蛋白质手段等，虽具备一定的准确性和精度，但存在样品处理复杂、检测耗时长、成本昂贵等缺点，难以满足现场实时监测的需求。在实际应用中，这些局限性可能导致无法及时发现致病菌，从而延误疾病的诊断和治疗，增加疾病传播的风险。因此，开发一种快速、准确、灵敏的肠道致病菌检测方法迫在眉睫。

1.2研究目的与意义

本研究旨在开发一种基于电化学传感技术的肠道致病菌检测新方法，以实现对肠道致病菌的准确、快速、灵敏、高效检测，提高肠道感染的早期预警能力。

该方法的开发具有重要的现实意义。在公共卫生领域，能够及时发现环境、食品中的肠道致病菌，有效预防和控制食源性疾病的爆发，保障公众的饮食安全。在医学研究方面，有助于医生快速准确地诊断肠道感染疾病，为患者提供及时有效的治疗方案，降低疾病的危害。此外，本研究还将为电化学传感技术在生物医学领域的深入应用提供重要的实验依据，推动该技术的发展和创新。

1.3国内外研究现状

在国外，电化学传感技术检测肠道致病菌的研究取得了显著进展。一些研究团队利用纳米材料修饰电极，提高了传感器的灵敏度和选择性。例如，通过将金纳米颗粒、碳纳米管等纳米材料与电极相结合，增强了电极表面的电子传递效率，从而实现了对低浓度肠道致病菌的检测。还有研究基于核酸适配体的特异性识别原理，构建了高选择性的电化学适配体传感器，能够准确识别目标肠道致病菌。

国内在该领域的研究也十分活跃。许多科研机构和高校致力于开发新型的电化学传感检测方法。一些研究采用基因序列作为检测靶标，设计并合成特异性的核酸探针，利用电化学传感技术实现了对肠道致病菌的快速检测。同时，国内在电极修饰材料的研发、检测系统的优化等方面也取得了一定的成果，不断提高检测方法的性能。

1.4研究方法与创新点

本研究采用电化学传感技术为主要手段，从基因序列入手，建立肠道致病菌的电化学传感检测系统。具体步骤包括设计针对目标菌株的引物和探针，合成核酸探针并进行验证，构建肠道致病菌检测电化学传感系统，大量筛选菌株并分离DNA，进行肠道致病菌和无菌控制组电化学信号的测定，应用检测方法进行肠道致病菌检测，针对检测结果进行数据分析和统计，评估方法的准确性和可靠性。

与传统检测方法相比，本研究开发的新方法具有多方面的创新之处。首先，基于基因序列的检测策略，实现了对肠道致病菌的高度特异性识别，有效避免了传统方法中可能出现的交叉反应。其次，结合电化学传感技术，具有快速响应的特点，大大缩短了检测时间，能够满足现场快速检测的需求。此外，通过优化电极修饰材料和检测条件，实现了极低检测限，提高了检测的灵敏度，能够检测到极低浓度的肠道致病菌。

二、肠道致病菌概述

2.1种类与特性

肠道致病菌种类繁多，对人体健康构成严重威胁。大肠杆菌（Escherichiacoli）作为肠杆菌科埃希氏菌属的代表菌，是人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引发肠道外感染。部分血清型菌株致病性强，会导致腹泻，被统称为致病大肠杆菌。大肠杆菌呈杆状，大小约为0.5-1.0微米×1.0-3.0微米，无芽胞，多数菌株有动力，具备普通菌毛与性菌毛，部分菌株有多糖类包膜，属于革兰氏阴性杆菌。在血琼脂平板上，部分菌株会产生β型溶血，在鉴别性或选择性培养基上会形成有颜色、直径2-3mm的光滑型菌落。其生化反应表现为大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气，IMViC试验结果为“+、+、-、-”，即为典型大肠杆菌。

沙门氏菌（Salmonella）属于细菌门、肠杆菌科、沙门菌属，是一类革兰氏阴性菌。其呈杆状，大小通常为0.7-1.5微米×2.0-5.0微米，具有周身鞭毛，能进行动力运动，部分菌株有荚膜。沙门氏菌广泛存在于动物和人类肠道中，可引发多种食物中毒和肠道感染，如急性肠胃炎、伤寒、副伤寒等疾病。主要通过污染的食品和水源传播，感染后症状包括发热、腹泻、呕吐等，每年全球约有1.2亿人感染沙门氏菌。

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