生物科技仿真操作题及参考答案解析.docxVIP

第PAGE页共NUMPAGES页

生物科技仿真操作题及参考答案解析

一、选择题（每题2分，共10题）

（针对生物医药行业，考察基因编辑技术应用）

1.在CRISPR-Cas9基因编辑系统中，引导RNA（gRNA）的主要功能是？

A.切割DNA双链

B.识别靶向序列

C.修复DNA断裂

D.转录基因表达

2.以下哪种情况下，基因编辑可能导致脱靶效应？

A.gRNA与靶向序列高度特异性结合

B.Cas9蛋白活性过高

C.细胞内存在大量gRNA-Cas9复合物

D.重复序列（PAM序列）缺失

3.在治疗遗传性疾病的基因编辑中，以下哪种技术最常用于减少免疫原性？

A.基因敲除

B.基因插入

C.基因沉默（RNA干扰）

D.基因编辑的“无框移码”技术

4.在动物模型中，CRISPR-Cas9编辑通常通过哪种方式递送？

A.电穿孔

B.病毒载体

C.微注射

D.以上所有

5.基因编辑在农业领域的应用不包括以下哪项？

A.提高作物抗病性

B.增加营养价值

C.优化生长周期

D.直接治疗人类疾病

二、填空题（每空1分，共5题）

（针对生物医药行业，考察细胞培养操作规范）

6.在细胞培养过程中，维持pH值在______范围内对细胞生长至关重要。

7.为了防止细胞污染，实验室应定期对______进行灭菌处理。

8.原代细胞培养时，首次传代前需用______消化贴壁细胞。

9.细胞冻存时，常用______作为保护剂防止细胞损伤。

10.MTT法检测细胞活力时，蓝色甲臜的形成与______成正比。

三、简答题（每题5分，共3题）

（针对生物医药行业，考察生物制品质量控制）

11.简述生物制品无菌检验的主要步骤。

12.列举三种常见的生物制品稳定性考察指标。

13.解释“生物负载”在生物制品生产中的意义。

四、实验设计题（10分）

（针对生物医药行业，考察实验方案设计能力）

设计一个实验方案，验证CRISPR-Cas9系统在肝癌细胞中的靶向效率。要求说明实验分组、主要试剂、观察指标及数据统计分析方法。

五、论述题（15分）

（针对生物医药行业，考察伦理与法规理解）

结合我国《基因技术伦理规范》，论述基因编辑技术在临床应用中的伦理风险及应对措施。

参考答案解析

一、选择题答案与解析

1.B

解析：gRNA通过互补配对识别靶向DNA序列，是Cas9蛋白切割的先决条件。其他选项中，Cas9负责切割，DNA修复机制参与修复，转录与gRNA功能无关。

2.C

解析：细胞内gRNA-Cas9复合物过量可能导致非特异性切割，即脱靶效应。其他选项中，特异性结合、PAM序列缺失均会降低脱靶风险。

3.D

解析：“无框移码”技术通过插入提前终止密码子，使蛋白表达截断，减少免疫原性。其他选项均无法直接降低免疫原性。

4.D

解析：动物模型中，电穿孔、病毒载体、微注射是常见的递送方式，需根据细胞类型和实验需求选择。

5.D

解析：基因编辑在农业领域主要用于作物改良，而直接治疗人类疾病属于生物医药范畴。

二、填空题答案与解析

6.7.35-7.45

解析：细胞培养最适pH值通常在此范围，过高或过低会影响酶活性及代谢。

7.超净工作台/生物安全柜

解析：防止微生物污染，需定期灭菌（如紫外消毒、高压蒸汽灭菌）。

8.胰蛋白酶/胶原酶

解析：消化细胞间连接，使细胞脱离培养皿。

9.DMSO（二甲基亚砜）

解析：常用冷冻保护剂，防止细胞形成冰晶。

10.活细胞数量

解析：MTT法通过细胞代谢还原显色，颜色深浅与活细胞量成正比。

三、简答题答案与解析

11.无菌检验步骤

-样品处理：溶解或稀释待检样品。

-接种：将样品接种至无菌培养基（如平板划线法）。

-培养：37℃培养48-72小时。

-观察与记录：检查是否有菌落生长，记录菌落数量。

解析：无菌检验需严格避免外源污染，常用培养法检测微生物。

12.稳定性考察指标

-效价/活性：如酶活性、抗体效价。

-纯度：通过SDS或HPLC检测杂蛋白。

-完好性：如核酸片段完整性。

解析：稳定性考察需全面评估产品在储存条件下的变化。

13.生物负载意义

指生物制品中微生物污染的水平，需符合药典标准（如CFU/mL）。过高可能导致产品失活或传播感染。

四、实验设计题答案

实验分组

-实验组：CRISPR-Cas9靶向肝癌细胞（如通过脂质体递送gRNA-Cas9）。

-对照组1：仅gRNA组（无Cas9切割活性）。

-对照组2：未编辑肝癌细胞。

主要试剂

-gRNA-Cas9复合物

-脂质体（递送载体）

-荧光染料（如DAPI标记DNA）

-细胞凋亡试剂盒

观察指标

-切割效率：荧光显微镜观察靶向位点DNA断裂（如绿色