选修第二三章克隆技术胚胎工程2讲课文档.pptVIP

选修第二三章克隆技术胚胎工程;（优选）选修第二三章克隆技术胚胎工程;2、克隆类型

;理论条件：细胞(主要是细胞核)具有全能性。

（具有克隆的潜能）

基本条件（主要针对高等动物）：

(1)具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞。

(2)能有效调控细胞核发育的细胞质物质(如去核的卵细胞)。

(3)完成胚胎发育的必要的环境条件(诱导核质重组细胞生长、分化的实验条件和怀胎母体的子宫环境)。;第二节植物的克隆;（1）植物组织培养的过程;

你认为培养基应有哪些成分?

你认为培养基应该是哪种物理状态?

与无土栽培培养液比较

;人工种子的制作——解决有些作物繁殖能力差,结子困难,发芽率低等问题。;（2）植物组织培养技术的应用;紫草;如何去除细胞壁？;原生质体的制备;植物体细胞杂交;第三节动物的克隆;;需要哪些营养?;血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。;营养（液体培养基）：

适宜的温度和pH：

气体环境

无菌、无毒环境

仪器;原代培养与传代培养;细胞贴壁过程;细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。;把一个单细胞从细胞群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。

;提高细胞克隆形成率的措施:

(1)选择适宜的培养基、添加动物血清

(2)以滋养细胞支持生长

(3)激素刺激（如胰岛素等）

(4)使用CO2培养箱调节pH

;植物组织培养和动物细胞培养的比较P200;细胞融合：

指用自然或人工方法,使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。

不同基因型的细胞之间的融合就是细胞杂交。;诱导融合的因素

生物法：灭活的仙台病毒诱导融合

利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。

这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分??似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。

化学法：聚乙二醇诱导融合

因为聚乙二醇易得、简便，且融合效果稳定，是目前应用最广泛的方法。

物理法：电激、激光诱导融合;动物细胞融合技术的应用;检测抗原;

;决定抗原特异性的特定部位----如1、2

;人们如何获得针对某种抗原的抗体?

传统的方法是什么？;第32页，共88页。;用从血清中获得的抗体进行检验时，有时会出现假阳性。;

2;（单克隆抗体）;单克隆抗体;单克隆抗体

——极富创造性的方案;动物免疫

分离B淋巴细胞

细胞融合——淋巴细胞杂交瘤的制备

杂交瘤细胞的筛选

克隆能产生抗体的细胞

单克隆抗体的纯化;单克隆抗

体的制备;单克隆抗体的应用;项目;B羊卵细胞;;第一节从受精卵谈起;;充满活力的精子;经过种种障碍的精子奋力向卵细胞游去;第48页，共88页。;;一、受精作用;囊胚期;受精卵;桑椹胚;囊胚期;蛙原肠胚剖面图;原肠胚阶段是个体发育中分化程度最高的阶段。;受精卵;下列关于受精作用及结果的叙述，正确的是

（????）

?A．精卵相互识别的基础是细胞膜的流动性

?B．后代从双亲各获得一半的DNA?

?C．使后代产生不同于双亲的基因组合?????????

?D．后代继承了双亲的全部遗传性状;1、下列哪项正确的表达了牛胚胎的发育顺序

A．配子→受精→合子→胚→卵裂

B．合子→胚→胎儿→幼体→成体

C．合子→卵裂→囊胚→原肠胚→胎儿

D．精卵细胞形成→受精→合子→胎儿→出生

2、哺乳动物受精卵在卵裂期发生的变化是

A.细胞的总面积与总体积的比值逐渐增大

B．细胞的数目增多，有机物含量大增

C．每个细胞的DNA含量不断增加，全能性增高

D．逐渐出现了原肠腔，并有了胚层的分化;下图表示蛙的受精卵发育至囊胚的过程中,DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、有机物

总量的变化趋势(横坐标为发育时间)。其中正确

的是();一个新的小生命-受精卵诞生了;受精卵一边分裂，一边向子宫移动，到达子宫需7-8天。;受精后7天。胚芽完成着陆,微微嵌入子宫内膜。此时它