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2025年动物生物化学实验考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）

1.在测定血清总蛋白的实验中，下列哪种试剂与蛋白质中的肽键发生双缩脲反应？

A.硫酸铜-酒石酸钾钠碱性溶液

B.磷钼酸-磷钨酸试剂

C.2,4-二硝基苯肼

D.三氯乙酸

【答案】A

【解析】双缩脲反应是肽键在碱性条件下与Cu2?形成紫色络合物，硫酸铜-酒石酸钾钠碱性溶液提供Cu2?并维持碱性环境。

2.采用SDS测定蛋白质分子量时，下列哪项操作会直接导致分子量计算偏差？

A.上样前95℃加热5min

B.浓缩胶浓度由4%提高到6%

C.分离胶浓度与标准蛋白不匹配

D.电泳缓冲液pH由8.3调至8.0

【答案】C

【解析】分离胶浓度决定线性分离范围，若与待测蛋白实际分子量区间不符，迁移率与logMW线性关系被破坏，导致计算偏差。

3.在肝糖原定量实验中，加入蒽酮试剂后需立即进行哪一步操作？

A.冰浴冷却

B.沸水浴加热10min

C.离心去沉淀

D.暗处静置30min

【答案】B

【解析】蒽酮法需强酸高温条件使糖原水解生成葡萄糖，再脱水生成羟甲基糠醛与蒽酮缩合显色，沸水浴10min为反应必需步骤。

4.测定血清ALT活性时，若空白管吸光度持续升高，最可能原因是：

A.底物α-酮戊二酸失效

B.2,4-二硝基苯肼溶液变质

C.丙酮酸标准品污染

D.酶活性过高

【答案】B

【解析】2,4-二硝基苯肼遇光热易分解产生棕色杂质，导致空白吸光度升高，干扰比色。

5.下列哪种层析技术依据蛋白质表面疏水性强弱实现分离？

A.离子交换层析

B.凝胶过滤层析

C.疏水层析

D.亲和层析

【答案】C

【解析】疏水层析介质偶联疏水配基，在高盐条件下蛋白质表面疏水区域与配基结合，通过降低盐浓度洗脱。

6.在提取小鼠肝线粒体时，加入EDTA的主要目的是：

A.抑制蛋白酶活性

B.螯合Ca2?、Mg2?防止膜聚集

C.维持渗透压

D.稳定pH

【答案】B

【解析】EDTA螯合二价阳离子，可抑制Ca2?依赖的磷脂酶及防止线粒体膜因金属离子桥联而聚集。

7.采用Wright-Giemsa复合染液对鸡血涂片染色后，细胞核呈紫红色，其主要原理是：

A.酸性染料伊红与碱性蛋白结合

B.碱性染料天青B与DNA磷酸基结合

C.染料氧化还原反应

D.脂溶性染料溶解膜脂

【答案】B

【解析】天青B为碱性染料，与核内DNA磷酸基负电荷结合，呈紫红色。

8.在测定血清尿素氮的脲酶-靛酚蓝法中，最终显色产物在波长____处有最大吸收。

A.450nm

B.520nm

C.630nm

D.340nm

【答案】C

【解析】脲酶分解尿素生成NH?，NH?与次氯酸钠、苯酚生成靛酚蓝，最大吸收630nm。

9.下列哪项操作可降低ELISA背景显色？

A.提高包被抗原浓度

B.延长TMB显色时间

C.增加封闭液中BSA浓度至5%

D.提高一抗稀释比至1:50

【答案】C

【解析】高浓度BSA可封闭微孔板剩余疏水位点，减少非特异吸附，降低背景。

10.在提取奶牛乳脂时，若采用Babcock法，下列哪种试剂用于溶解非脂固形物？

A.浓硫酸

B.乙醇

C.异戊醇

D.乙醚

【答案】A

【解析】浓硫酸使酪蛋白变性溶解，释放脂肪，离心后脂肪柱读数。

二、填空题（每空1分，共20分）

11.采用Folin-酚法测定蛋白质时，试剂甲含Na?CO?、NaOH、CuSO?及________，其作用是________。

【答案】酒石酸钾钠；稳定Cu2?防止生成Cu(OH)?沉淀

12.在醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白时，缓冲液pH8.6条件下，________带负电荷最多，向________极移动最快。

【答案】白蛋白；正

13.测定血清碱性磷酸酶活性时，若采用对硝基苯磷酸二钠为底物，产物对硝基苯酚在________nm处有吸收，其摩尔吸光系数为________L·mol?1·cm?1。

【答案】405；18600

14.提取猪骨骼肌糖原时，加入________溶液可沉淀RNA，离心后取上清用于糖原测定。

【答案】5%三氯乙酸

15.在测定小鼠脑组织SOD活性时，采用邻苯三酚自氧化法，若自氧化速率控制在________A/min，可保证抑制率线性范围。

【答案】0.070