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基于核酸适配子的生物传感器：原理、构建与多元应用探究

一、引言

1.1研究背景与意义

在生命科学、医学诊断、环境监测以及食品安全等众多领域，对生物分子的准确、快速、高灵敏检测始终是研究的核心与热点。生物分子检测技术对于疾病的早期诊断、环境污染物的监测以及食品质量的把控起着至关重要的作用。例如，在医学领域，早期准确检测疾病相关的生物标志物，如肿瘤标志物、病原体核酸等，能够为疾病的早期诊断和治疗提供关键依据，大大提高患者的治愈率和生存率；在环境监测方面，对水体、土壤中重金属离子、有机污染物等生物分子的检测，有助于及时发现环境污染问题，采取有效的治理措施，保护生态环境；在食品安全领域，对食品中的致病菌、毒素等生物分子的检测，是保障公众饮食安全的重要手段。

核酸适配子（Aptamer）是通过指数富集配体系统进化技术（SELEX）从随机寡核苷酸文库中筛选得到的单链DNA或RNA分子。这些分子能够通过分子内碱基配对、静电作用、氢键以及范德华力等相互作用，折叠形成独特的三维空间结构，从而可以特异性地识别并结合各种靶分子，包括蛋白质、多肽、金属离子、小分子有机物，甚至完整的细胞和病毒等。与传统的抗体相比，核酸适配子具有诸多独特的优点。首先，其分子量相对较小，一般在5-15KD之间，这使得它们能够更快速地扩散并与靶标结合，同时也更容易穿透生物膜，在细胞内检测等应用中具有明显优势。其次，核酸适配子的靶标范围极为广泛，几乎可以针对任何感兴趣的物质进行筛选，极大地拓展了生物传感的检测对象。再者，核酸适配子具有较低的免疫原性，在生物体内应用时引起免疫反应的风险较低，有利于其在临床诊断和治疗等方面的应用。此外，核酸适配子稳定性好，可在多种条件下保存和使用，并且能够通过化学合成的方法大量制备，成本相对较低，易于进行修饰和标记，方便与各种信号转换元件相结合，构建多样化的生物传感器。

生物传感器作为一种将生物识别元件与信号转换元件相结合的分析工具，能够将生物分子之间的特异性相互作用转化为可检测的电信号、光信号或其他物理信号，从而实现对目标物质的快速、灵敏检测。它在生物分析、医学诊断、环境监测、食品安全检测等众多领域展现出巨大的应用潜力。传统的生物传感器在识别元件的选择上存在一定的局限性，例如抗体作为识别元件时，存在制备过程复杂、成本高、稳定性差以及免疫原性等问题，限制了其在一些领域的广泛应用。

将核酸适配子引入生物传感器的构建中，形成基于核酸适配子的生物传感器，实现了两者优势的有机结合。核酸适配子的特异性识别功能与生物传感器的信号转换功能相结合，使得这类传感器能够对目标生物分子进行高选择性、高灵敏度的检测，在实际应用中展现出了巨大的潜力。在临床诊断领域，它能够实现对疾病相关生物标志物的快速、准确检测，为疾病的早期诊断和治疗监测提供有力支持；在环境监测方面，可用于检测环境中的污染物，及时准确地反映环境质量状况，为环境保护和污染治理提供科学依据；在食品安全检测中，能够快速检测食品中的有害物质，保障食品安全。因此，开展基于核酸适配子的生物传感器的研究具有重要的理论意义和实际应用价值。

1.2国内外研究现状

在核酸适配子筛选方面，自1990年Ellington和Tuerk等首次利用SELEX技术筛选出能与靶分子特异性结合的核酸适配子以来，该技术不断发展和完善。最初的SELEX技术筛选周期长、工作量大，随着技术的改进，出现了多种优化的筛选方法。例如，毛细管电泳-SELEX技术利用毛细管电泳的高效分离能力，能够快速分离与靶分子结合的核酸适配子，大大缩短了筛选时间；微流控SELEX技术则将筛选过程集成到微流控芯片上，实现了筛选的微型化、自动化和高通量，提高了筛选效率并降低了成本。同时，针对不同靶标的核酸适配子筛选也取得了丰富的成果，从最初的蛋白质、小分子等简单靶标，扩展到细胞、病毒、外泌体等复杂靶标。如针对肿瘤细胞表面特异性标志物筛选得到的核酸适配子，为肿瘤的早期诊断和靶向治疗提供了新的工具。

在生物传感器构建方面，随着材料科学、纳米技术和电子技术的不断进步，生物传感器的性能得到了显著提升。新型电极材料的开发，如碳纳米材料（碳纳米管、石墨烯等）、金属纳米颗粒（金纳米颗粒、银纳米颗粒等）以及量子点等，因其具有高比表面积、良好的导电性和生物相容性等特性，被广泛应用于生物传感器的电极修饰，能够有效提高传感器的灵敏度和稳定性。例如，石墨烯修饰的电极可以增强电子传递效率，降低检测背景噪声，提高生物传感器的检测性能。同时，微纳加工技术的应用使得生物传感器的制备更加精确和可控，能够实现传感器的微型化和集成化，便于现场快速检测。此外，信号转换技术也不断创新，除了传统的电化学、光学信号转换方式外，还发展了基于表面等离子体共振、电化学发光、