基因工程及其应.pptVIP

第1页，共40页，星期日，2025年，2月5日鹰狗？第2页，共40页，星期日，2025年，2月5日虎蚕？第3页，共40页，星期日，2025年，2月5日香蕉还是辣椒？第4页，共40页，星期日，2025年，2月5日请您欣赏能产生人胰岛素的大肠杆菌第5页，共40页，星期日，2025年，2月5日1、基因工程的概念、原理、操作水平、优点。2、基因剪刀是什么？其特点、作用和结果是什么？3、黏性末端有什么特点？其碱基可以通过什么连接？4、基因针线是什么？与DNA聚合酶的异同是什么？5、基因运载体的作用是什么？常用的有哪些？6、质粒的实质是什么？主要存在于哪里？7、基因工程的操作步骤有哪四步？8、简述抗虫棉的培育过程。基因工程及其应用第6页，共40页，星期日，2025年，2月5日1、概念：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。一、基因工程的概念2、原理：基因重组3、操作水平：分子水平4、优势：①定向地改造生物的遗传性状②打破种的界限第7页，共40页，星期日，2025年，2月5日基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶（限制酶）基因的“针线”──DNA连接酶基因的运载体二、基因工程的操作工具第8页，共40页，星期日，2025年，2月5日1、特点：一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定切点切割DNA分子（专一性）；2、作用：切断外源DNA，对自身DNA不破坏3、结果：①错位切----黏性末端②平切----平末端（一）基因剪刀----限制性核酸内切酶（限制酶）第9页，共40页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌的一种限制酶(EcoR1)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶第10页，共40页，星期日，2025年，2月5日限制酶第11页，共40页，星期日，2025年，2月5日什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。第12页，共40页，星期日，2025年，2月5日1、作用：通过形成磷酸二酯键，将脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA外侧链上的缺口连接起来。（二）基因针线----DNA连接酶磷酸二酯键第13页，共40页，星期日，2025年，2月5日2、常用：质粒、噬菌体、动植物病毒（三）基因的运载体1、作用：将外源基因送入受体细胞质粒实质：环状DNA分子存在：细菌及酵母菌细胞中第14页，共40页，星期日，2025年，2月5日质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。第15页，共40页，星期日，2025年，2月5日2、常用：质粒、噬菌体、动植物病毒（三）基因的运载体1、作用：将外源基因送入受体细胞质粒实质：环状DNA分子存在：细菌及酵母菌细胞中3、必备条件：①能在宿主细胞中复制并稳定保存；②具有多个限制酶的切点③具有标记基因（如抗生素的抗性基因）第16页，共40页，星期日，2025年，2月5日提取目的基因1目的基因与运载体结合2将目的基因导入受体细胞3目的基因的检测与鉴定4三、基因工程的基本步骤第17页，共40页，星期日，2025年，2月5日（一）提取目的基因1、目的基因：是人们所需要转移或改造的基因。如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。直接分离基因（用限制性内切酶）人工合成基因2、目的基因的提取方法3、一般要使用限制性核酸内切酶第18页，共40页，星期日，2025年，2月5日（二）目的基因与运载体结合1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。第19页，共40页，星期日，2025年，2月5日重组质粒的构建过程质粒DNA分子限制酶处理两个