标记包括同位素标记和非同位素标记.PPTVIP

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LPO法此法是利用LPO促进微量H2O2氧化I*-进行蛋白质碘化反应。蛋白质2~10μg溶于10~50μl0.5mol/LpH=7.5磷酸盐缓冲液NaI*37~370MBq5~50μlLPO20~100ng5~50μlH2O215~150ng4.5~45μl,分三次加入反应时间30~60min,加巯基已醇或用缓冲液稀释终止反应LPO法注意事项:pH=4.0~8.5,范围较宽LPO量最好不超过总蛋白质用量的1%,以减少酶自身碘化而带入放射化学杂质过氧化氢应保持低浓度,如高于0.1mmol/L,对酶的活性有抑制作用LPO的特点:优点:反应条件温和,标记化合物能保持原有的生物和免疫活性缺点:标记率较低,一般20~40%;LPO酶本身可能被碘化。Iodogen法:氯甘脲(Iodogen)不溶于水,易溶于二氯甲烷等有机溶剂。标记之前,应先涂管;标记;终止标记。优点:固-液反应体系;弱氧化剂;无需加入还原剂。主要用于标记蛋白质和多肽(酪氨酸残基)。Iodogen标记过程涂管碘化涂管溶有Iodogen的二氯甲烷氮气碘化Iodogen与蛋白质最适摩尔比为8:1,pH值为6.0~8.5,反应温度为0~室温,反应时间为2~20min。Iodogen法特点标记率高Iodogen不溶于水,直接对活细胞标记终止反应不加还原剂,损伤更小固相氧化,损伤小步骤简化,条件宽松显像治疗标记化合物(labeledcompound):化合物中某一个或多个原子或其化学基团,被其易辨认的同位素或其它易辨认的核素,或其基团所取代而得到的产物。标记包括同位素标记和非同位素标记。一、概述标记化合物的命名

无机化合物:只要在化合物名称前面标记核素的符号(如:131I-NaI),也可在分子式中直接注明标记核素(如:Na131I)。

有机标记化合物:采用前置方括号命名法。即在标记化合物名称中表示标记核素所处部位之前,加一方括号,标明核素标记的位置与数目,希腊字母或词头以及标记核素的符号(如:25-羟基[26,27-甲基-T]维生素D3)。分类种类无机标记物(131I-NaI)有机标记物([99Tcm]-DTPA)生物标记物(125I-SOD)标记核素同位素标记物(89Sr-SrCl2)非同位素标记物(125I-各种抗体)标记物的溶解度液体标记物(Na131I溶液)胶体(32P-磷酸铬胶体)固体标记物(90Sr玻璃微球)基本概念同位素标记(isotopiclabeling)化合物中的原子被其同位素原子取代,称为同位素标记。又称理想标记。如:131I-OIH和3H-TdR(3H-thymidine,3H-胸腺嘧啶)。非同位素标记(non-isotopiclabeling)用化合物组成以外的原子标记,称非同位素标记,又称非理想标记。如:131I-甲胎球蛋白,99Tcm–DTPA。定位标记(specificlabeling)(S)95%以上的标记原子限定在指定位置在指定位置。如:S-[5-T]尿嘧啶。名义定位标记(nominallabelling)(n)标记过程中从标记方法预测,标记原子应该在某特定的位置上,而实际结果未作鉴定,或特定位置上的标记物不能肯定大于95%。如:[6,7(n)-T]雌二醇。全标记(generallabeling)(G)

它是指标记分子中所有稳定位置上的氢原子都可能被标记原子所取代,只是程度不同。如:[G-T]胆固醇。均匀标记(uniformlabeling)(U)

统计学上标记原子均匀分布在标记化合物分子中。如[U-14C]葡萄糖。全标记和均匀标记皆为非定位标记,可得到较高比活度,但不能观察分子上特定原子的行为。双标记(doublelabeling)与多标记(multiplelabeling)

化合物分子中的原子被两种或多种元素的同位素的原子以及被同一种元素的两种或多种同位素所取代。如:

14C3H314CO13COOH

15NH214CH2COOH可同时观察两个或多个指标,减少工作量,但制备难,价格贵。放射性核素的选择研究的目的(基础研究、诊断、治疗)诊断(?、??)治疗(?、??、e俄歇、eIT)核素的性质(物理化学性质、核性质)标记化合物的质量(标记率、比活度、纯度、测量)其它(价格、毒性)

在化合物标记过程中,应优先考虑同位素标记,也可用非同位素标记。医用放射性标记化合物的特点与制备要求

特点:放射性标记具有时间性操作时需注意放射性污染和防护问题废物处理很重要不稳定性(包括分解、脱落、位

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