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直接抗球蛋白试验

阳性患者血液输注

目录CONTENTS12345直接抗球蛋白试验的概念直接抗球蛋白试验的应用直接抗球蛋白试验阳性的原因直接抗球蛋白试验检测注意事项直接抗球蛋白试验试验阳性结果的分析6直接抗球蛋白试验阳性患者血液输注

直接抗球蛋白试验(DAT)：用于检测红细胞在体内是否被免疫球蛋白和/或补体致敏。每个红细胞上都有少量的lgG和补体存在，这些IgG和补体的量低于常规检测技术的检出下限。只有当每个红细胞上含有100~500个IgG分子或400~1100个C3d分子时，常规的实验手段才能检出，也就是DAT呈阳性。DAT阳性率在健康献血者中为1:1000~1:14000,在住院患者中为1%~15%。DAT结果阳性可能与免疫介导的溶血反应相关，也可能无关。一、直接抗球蛋白试验的概念

母亲体内IgG类同种抗体致敏胎儿红细胞1、HDN诊断输血史/妊娠史导致体内同种抗体滴度升高引起红细胞破坏①药物诱导产生抗药物或红细胞膜抗体②针对药物和红细胞膜形成抗原产生抗体B淋巴细胞功能异常亢进，产生抗自身红细胞的抗体，结合于红细胞表引起红细胞破坏并表现出贫血症状。AIHA诊断0102032、DIHA诊断04二、直接抗球蛋白试验的应用溶血反应

红细胞固有抗原自身抗体溶血性输血反应胎儿及新生儿溶血性疾病药物诱导的抗体被动获得的同种抗体（例如来自献血者血浆、衍生物或免疫球蛋白）非特异性吸附的蛋白（例如高丙种球蛋白血症、大剂量静脉内注射丙种球蛋白或一些药物引起的红细胞膜改变）由于细菌感染、自身抗体或同种抗体引起的补体激活过客淋巴细胞产生的抗体（例如器官或者造血干细胞移植）三、导致直接抗球蛋白试验结果阳性的主要原因

用于洗涤红细胞的生理盐水应为室温；用温盐水(如37℃)洗涤红细胞则可能引起低亲和力的IgG抗体从红细胞上脱落。室温盐水洗涤使用柱凝集试验(例如：凝胶检测)进行DAT不需要洗涤红细胞，因为血浆蛋白不中和红细胞与检测抗体的结合反应。（经适当的离心作用，红细胞可以进入柱体，而血清或血浆仍留在柱体上方）这种方法可能更利于低亲和力IgG抗体的检出。微柱凝胶实验不需洗涤试验前需要洗涤红细胞以去除游离的血浆球蛋白和补体成分。否则，二者可能中和抗球蛋白试剂，导致假阴性反应。洗涤红细胞洗涤细胞过程不应中断，特别是手工洗涤时，红细胞洗涤后需立即检测，以避免出现IgG被洗脱引起的假阴性结果。洗涤后的红细胞不能放置过久。洗涤过程连续四、直接抗球蛋白试验检测注意事项

仅DAT阳性不能诊断溶血性贫血。对DAT结果阳性的解释需要了解患者的诊断、近期用药史、妊娠史和输血史、造血干细胞移植史，以及是否存在获得性或无法解释的溶血性贫血。保持与临床医生沟通非常重要，需要将患者临床情况与实验室结果相结合，来对DAT阳性结果进行分析。五、直接抗球蛋白试验阳性结果的分析

（1）有体内溶血的证据(例如红细胞破坏)贫血患者DAT结果阳性，且有溶血的证据：网织红细胞增多；外周血涂片观察到球形红细胞；血红蛋白血症；血红蛋白尿；血清结合珠蛋白减少；血清未结合(间接)胆红素或者乳酸脱氢酶(LDH)水平增高，尤其是LDH1增加。如果没有溶血性贫血的证据，就没有必要进行进一步的检测，除非患者需要输注红细胞而血清中有针对红细胞抗原的不完全抗体。检测放散液可有助于抗体鉴定五、直接抗球蛋白试验阳性结果的分析1、病史

(2)近期输血史。当患者最近有输血史，DAT阳性可能是提示免疫应答的首个指标，抗体致敏了输入的含有相应抗原的红细胞，使DAT结果变成弱阳性(通常2+)。但是血清中抗体数量可能不足，不易检出。抗体最早可能出现在初次输血免疫后7~10天，再次输血免疫后最早1~2天出现。这些同种抗体可以缩短已经输注或后续输注的红细胞的存活时间。输血后的DAT结果可能为混合外观(即献血者红细胞凝集及患者的红细胞不凝集),也可能不出现混合外观。五、直接抗球蛋白试验阳性结果的分析1、病史

(3)药物相关免疫介导溶血相关药物的使用。已经报道很多药物可能会引起DAT结果阳性和/或免疫介导的溶血反应。(4)造血干细胞或器官移植史。供者来源的过客淋巴细胞产生针对受者红细胞上ABO或其他血型抗原的抗体，导致DAT结果阳性。五、直接抗球蛋白试验阳性结果的分析1、病史

(5)静脉注射免疫球蛋白或静脉注射抗-D：IVIG可能含有ABO抗体，抗-D或其他抗体。RhD阳性患者通过静脉注射抗-D。用于治疗免疫性血小板减少症(以前被称为“免疫性血小板减少性紫癜”)可引起DAT结果阳性。6)有可能与红细胞表面靶抗原反应的干扰治疗药物的用药史：例如，由于红细胞上存在少量的CD38,采用抗-CD38(即达雷木单抗)治疗骨髓瘤可导致抗-CD38与所有红细胞发