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海南pcr上岗证题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.以下哪种是PCR反应中常用的DNA聚合酶？（）

A.淀粉酶

B.限制性内切酶

C.TaqDNA聚合酶

D.脲酶

答案：C

解析：TaqDNA聚合酶具有耐高温等特点，适合PCR反应条件，是PCR常用的DNA聚合酶。

2.PCR反应体系中模板的作用是？（）

A.提供能量

B.提供反应场所

C.作为扩增的起始序列

D.催化反应进行

答案：C

解析：模板DNA是PCR扩增的起始序列，通过引物延伸来扩增特定片段。

3.PCR反应中退火温度的设定主要取决于？（）

A.引物长度

B.模板浓度

C.缓冲液成分

D.DNA聚合酶活性

答案：A

解析：引物长度影响退火温度，一般引物长度越短，退火温度越低。

4.下列关于PCR引物设计的说法错误的是？（）

A.引物长度一般为15-30bp

B.引物GC含量应在40%-60%

C.引物自身不应存在互补序列

D.引物与模板的结合可以不遵循碱基互补配对原则

答案：D

解析：引物与模板结合必须遵循碱基互补配对原则，这是PCR扩增准确进行的基础。

5.PCR技术的发明人是？（）

A.孟德尔

B.巴斯德

C.穆里斯

D.沃森和克里克

答案：C

解析：穆里斯发明了PCR技术。

6.PCR反应中延伸温度一般为？（）

A.37℃

B.55℃

C.72℃

D.95℃

答案：C

解析：72℃是TaqDNA聚合酶发挥活性进行延伸反应的适宜温度。

7.以下哪种物质可作为PCR反应的终止剂？（）

A.甘油

B.EDTA

C.SDS

D.酚

答案：B

解析：EDTA能螯合金属离子，抑制DNA聚合酶活性，可作为PCR反应的终止剂。

8.PCR反应中dNTP的作用是？（）

A.提供能量

B.作为合成新DNA链的原料

C.稳定反应体系

D.增强DNA聚合酶活性

答案：B

解析：dNTP（脱氧核苷酸三磷酸）是合成新DNA链的原料，在DNA聚合酶作用下参与链的延伸。

9.进行PCR反应时，循环次数一般为？（）

A.5-10次

B.10-20次

C.20-30次

D.30-40次

答案：C

解析：一般20-30次循环能使目的DNA片段得到有效扩增。

10.下列关于PCR产物检测的方法中，最常用的是？（）

A.凝胶电泳

B.比色法

C.荧光定量法

D.质谱分析法

答案：A

解析：凝胶电泳可直观地检测PCR产物的大小和条带情况，是最常用的检测方法。

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系通常包括以下哪些成分？（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTP

D.DNA聚合酶

E.缓冲液

答案：ABCDE

解析：模板DNA是扩增对象，引物引导扩增，dNTP是合成原料，DNA聚合酶催化反应，缓冲液维持反应环境，这些都是PCR反应体系的基本成分。

2.引物设计的原则包括？（）

A.引物长度适宜

B.GC含量合适

C.避免自身互补

D.与模板特异性结合

E.3端可互补

答案：ABCD

解析：引物长度一般15-30bp，GC含量40%-60%，自身不能互补，要与模板特异性结合，3端不能互补，否则易引发错配。

3.PCR反应过程包括？（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.复性

E.水解

答案：ABC

解析：变性使模板DNA双链解开，退火引物与模板结合，延伸在DNA聚合酶作用下合成新链，这是PCR的三个基本反应过程。

4.影响PCR反应结果的因素有？（）

A.模板质量

B.引物浓度

C.Mg2?浓度

D.反应时间

E.循环次数

答案：ABCDE

解析：模板质量不佳、引物浓度不合适、Mg2?浓度不当、反应时间和循环次数不合理等都会影响PCR反应结果。

5.PCR技术可应用于？（）

A.基因克隆

B.遗传病诊断

C.病原体检测

D.肿瘤诊断

E.亲子鉴定

答案：ABCDE

解析：PCR技术在基因克隆中可扩增目的基因，在遗传病、病原体、肿瘤诊断及亲子鉴定等方面都有广泛应用。

6.以下属于PCR技术优点的是？（）

A.灵敏度高

B.特异性强

C.操作简便

D.快速高效

E.成本低廉

答案：ABCD

解析：PCR技术灵敏度高可检测微量核酸，特异性强能准确扩增目的片段，操作简便，快速高效，但成本并不低廉，涉及试剂等成本。

7.PCR产物可能出现的问题有？（）

A.非特异性扩增

B.扩增失败

C.产物量不足

D.产物降解

E.条带单一

答案：ABCD

解析：可能出现非特异性扩增，扩增失败，产