溴甲酚绿法测定血清白蛋白.pptxVIP

二、试验原理

pH=pI

pHpI

pHpI

氨基酸兼性离子

阴离子

阳离子

血清清蛋白pI为：4-5.8

在pH4.2缓冲液中，清蛋白带正电荷

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

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血清清蛋白在pH4.2缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物，在波长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与清蛋白浓度成正比。

与一样处理清蛋白标准比较，可求得血清中清蛋白含量。

二、试验原理

清蛋白+BCG蓝绿色复合物

+-

pH4.2

Brij-35

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

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三、试剂与器材

1.0.5mol/L琥珀酸缓冲贮存液

2.10mmol/LBCG贮存液

3.叠氮钠贮存液

4.聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）贮存液

5.BCG试剂

6.40g/L清蛋白标准液

7.分光光度计

ddH2O400mL

琥珀酸缓冲贮液100mL

BCG贮液8.0mL

叠氮钠贮液2.5mL，Brij-35贮液2.5mL，ddH2O定容至1000mL。

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

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立刻混匀后，在波长630nm处用空白管调零，30s±3s内读取吸光度。

加入物（mL）

空白管（B）

标准管

测定管

S1