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《动物疫病检验技术》

犬细小病毒病胶体金快速检测

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犬细小病毒病胶体金快速检测

犬细小病毒病是犬的一种具有高度接触性传染的烈性\t/item/%E7%8A%AC%E7%BB%86%E5%B0%8F%E7%97%85%E6%AF%92%E7%97%85/_blank传染病。

临床特征：感染细小病毒的狗狗前期主要表现为呕吐和腹泻，后期狗狗主要表现为拉血或是吐血；患这种病的狗狗的死亡率非常高，这种病的病程非常固定，一共是7天的病程，7天之内狗狗会持续的呕吐、腹泻、厌食形成沉郁；如果狗狗挺过7天就能够痊愈，如果挺不过，那么7天内随时出现死亡现象。这个病的治疗主要是在医院注射病毒单克隆抗体或高免血清。

早发现早治疗可以降低狗狗的死亡率，那么，在临床上我们如何诊断该病呢？犬细小病毒胶体金试纸条检测犬粪便中细小病毒抗原。

一、目的：掌握犬细小病毒胶体金试验的操作和判定标准。明确此试验在生产中的应用。

二、原理：犬细小病毒检测试纸条是以免疫层析法定性地检测犬粪便中的犬细小病毒抗原。试剂条内的两种单克隆抗体识别不同的抗原表面决定簇。如果样品中含有犬细小病毒，病毒就会与金标垫上胶体金包被的单克隆抗体结合，形成抗体抗原复合物。这个复合物流到膜的检测线(T线)时，再与另一单克隆抗体结合形成“抗体抗原抗体”三明治形式的复合物并逐渐凝集成一条可见的T线，未结合的胶体金抗体流过T线被质控线(C线)的二抗捕获并形成可见的C线。检测结果通过C线和T线显示。

三、材料：(20次检测盒)

1、犬细小病毒抗原快速检测试卡20个

2、装有样品稀释液的样品收集管20个

3、一次性滴管20个

4、样品收集棉签20个

5、使用说明书1份

检测卡构成

在检测卡的外表有标记:?S?(加样)、T?(检测线)、C?(质控线)

检测卡的内部包括:样品垫、金标垫、硝酸纤维膜、吸收垫。

用途：检测犬粪便中的犬细小病毒抗原。

四、采集样本：犬粪便

样品保存

1、保存在2-8°C可保存24小时，需要更长时间保存可以保存于在-20°C甚至更低。

2、使用前确保样品温度为22-25°C

五、检测步骤

1、用已被样品稀释液沾湿的棉签收集犬粪便，然后将棉签放入含有样品稀释液的样品管中。(不要使用粘性或结团的粪便)

2、旋转摇动含棉签的样品管，使棉签上的样品和样品稀释液充分混匀。

3、将100ul(3滴)混合液缓慢地，-滴一滴加入样品孔中。

4、当反应进行时，你会看到黑红色的条带在试纸中间的结果窗中移动(若没看到液体在试纸结果窗流动，请用手按压卡壳“T”与“S”之间的位置，直至看到有样品流上去为止)

5、5-20分钟内读取结果(20分钟后的结果为无效)

六、结果判定

七、注意事项

1、打开检测卡的密封袋后，请在10分钟内加样使用。因为试纸卡对湿度非常敏感，会影响结果。

2、检测中，仅可以使用试纸盒中的稀释液。不要使用自来水、纯化水及蒸馏水作为阴性对照。

3不要使用已用过的试纸条。

4、不要使用包装破裂、密封不好以及过期的产品。

5、检测样品可能具有潜在感染性，样品和使用过的试剂应作为微生物危险品处理。

6、本试纸条为兽医对犬病的体外快速诊断工具，仅提供定性检测结果，应综合临床症状或其他常规检测方法进行确诊。