Protein A残留检测操作程序.pdfVIP

方法：

ProteinA是一种金葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的

Fc区结合。重组抗EGFR人鼠嵌合单克隆抗体经GE公司生产的MabSelectSuRe亲和填料纯化，需

要检测原液和制剂中MabSelectSuRe填料即重组ProteinA的残留量。本方法采用Repligen公司生产

的针对MabSelectSuRe填料的试剂盒，利用酶联免疫吸附法特异性检测样品中的ProteinA含量，从

而得出ProteinA的残留量。

适用范围：

本操作程序适用于纯化中和纯化后的各中控样品以及B产品原液BDS的ProteinA残留分

析。

职责：

操作人员：

➢严格按照此规程要求进行操作。

岗位主管：

➢起草文件，并确保操作程序的准确性、技术内容的完整性及文件的及时更新；

➢监督操作规程是否与实际过程一致，资源是否满足要求；➢培训，确保此

操作规程的正确实施。

程序：

1术语解释样品ProteinA含量：用ELISA的方法测试到的样品中ProteinA的浓度

（单位：纳克/毫升）2仪器设备2.1移液管，200μl，1000μl；1200μl；2.2多通道移液

器，300μl；1200μl；2.3单通道移液器，100μl；200μl；1000μl；2.41.5mlEP管；

2.5漩涡混合器（精科实业/Kylin‑BellLabInstruments，型号XW‑80A）2.6带有

SoftMaxPRO数据分析软件的酶标仪（MolecularDevices，型号THERMOmax）。3

试剂

3.1用于检测MabSelectSuRe的蛋白AELISA试剂盒(RepliGen,P/N9333‑1)。

试剂A:5×稀释缓冲液,20毫升

试剂B:rProteinATM溶液,1毫克/毫升,200μl

试剂C:生物素标记兔抗‑蛋白A抗体,200μl

试剂D:链霉亲和素‑过氧化物酶聚合物,200μl

试剂E:TMB过氧化物酶底物,20毫升

抗‑蛋白A包被的96孔板板架和板条

方法：

ProteinA是一种金葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是

IgG）的Fc区结合。重组抗EGFR人鼠嵌合单克隆抗体经GE公司生产的MabSelectSuRe

亲和填料纯化，需要检测原液和制剂中MabSelectSuRe填料即重组ProteinA的残留量。本

方法采用Repligen公司生产的针对MabSelectSuRe填料的试剂盒，利用酶联免疫吸附法特

异性检测样品中的ProteinA含量，从而得出ProteinA的残留量。

适用范围：

本操作程序适用于纯化中和纯化后的各中控样品以及B产品原液BDS的ProteinA残

留分析。

职责：

操作人员：

➢严格按照此规程要求进行操作。

岗位主管：

➢起草文件，并确保操作程序的准确性、技术内容的完整性及文件的及时更新；

➢监督操作规程是否与实际过程一致，资源是否满足要求；

➢培训，确保此操作规程的正确实施。

程序：

1术语解释

样品ProteinA含量：用ELISA的方法测试到的样品中ProteinA的浓度（单位：ng/ml）

2仪器设备

2.1移液管，200μl，1000μl；1200μl；

2.2多通道移液器，300μl；1200μl；

2.3单通道移液器，100μl；200μl；1000μl；

2.41.5mlEP管；

2.5漩涡混合器（精科实业/Kylin-BellLabInstruments，型号XW-80A）

2.6带有SoftMaxPRO数据分析软件的酶标仪（MolecularDevices，型号THERMOmax）。

3试剂

3.1ProteinAELISAkitfordetectionofMabSelectSuRe试