血液系统疾病动物模型的制备(与“贫血”有关的文档共64张).pptxVIP

血液系统疾病动物模型的制备(与“贫血”有关的文档共64张).pptx

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血液系统疾病动物模型的制备;血栓形成的动物模型;一.血栓形成的实验动物模型;血管的止血功能

血液凝固反应

血小板的作用;血管壁的损伤:内皮损伤,内皮下基质(ECM)裸露

血流状态的改变:血流缓慢或涡流形成

血液性质的改变:高凝状态;血管内皮损伤;;;;纤溶酶原纤溶酶抑制物;1.兔体外血栓形成模型;造模方法:

Rabbitsanesthetizedwithintramuscularinjectionsof5mg/kgxylazine(甲苯噻嗪)and30mg/kgketaminehydrochloride,maintaineddilutedketamine(2mg/ml,IV)atarateof1.53mg/kg/hr

Mechanicalventilationviaatracheotomy

Bodytemperaturemonitoredwitharectalprobeandmaintainedat37°Cusingawater-jacketedheatingblanket.

Extracorporealcirculation(ECC,4hrs)bycannulatingtheleftcarotidarteryforECCinflowandleftfemoralvein(orrightexternaljugularvein)forECCoutflow

通过肌内注射5mg/kg赛拉嗪(甲苯噻嗪)和30mg/kg氯胺酮盐酸盐麻醉的兔子以1.53mg/kg/hr的速率维持稀释的氯胺酮(2mg/ml,IV)

通过机械通气行气管切开术

用直肠探针监测体温,并使用水套加热毯维持在37℃。

体外循环(ECC,4小时),通过插管用于ECC流入的左颈动脉和用于ECC流出的左股静脉(或右外颈静脉);15cm,1/4inch

polyurethanecatheter;PlateletaggregationusingaChrono-Logopticalaggregometer.

ObtainPRPandPPPbycentrifugation,100%lighttransmissionsetbyPPPand0%byPRP

;Flowcytometrydetection:

Plateletactivation

P-selectin(CD62P)expression,

ActivatedGPIIb/IIIa(fibrinogenreceptor)

Leukocyteactivation

MonocyteMAC-1(CD11b/CD18)andCD14

expressionNutrophilMAC-1andCD14expression

Platelet-leukocyteadhesion

Plateletmarker(CD61,CD42)andleukocytemarker

(CD11b),doublestained

流式细胞术检测:

???血小板活化

??????P-选择素(CD62P)表达,

??????活化GPIIb/IIIa(纤维蛋白原受体)

???白细胞活化

??????单核细胞MAC-1(CD11b/CD18)和CD14

??????表达NutrophilMAC-1和CD14表达

??血小板-白细胞粘附

??????血小板标志物(CD61,CD42)和白细胞标志物

??????(CD11b),双染

;Thrombusquantitation:

Circuitsremovedafter4hrsonECC

Rinsedwithnormalsaline

ResidualthrombusinthelargertubingofECC

photographed

ImagequantitatedusingImageJimagingsoftware

血栓定量:

??在ECC上4小时后,移除电路

??用生理盐水冲洗

??拍摄在ECC的较大管中的残余血栓

??使用ImageJ成像软件进行图像定量;Biomaterials.2010Apr;31(10):2736.;造模原理:

血小板接触粗糙面发生

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