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血液系统疾病动物模型的制备;血栓形成的动物模型;一.血栓形成的实验动物模型;血管的止血功能
血液凝固反应
血小板的作用;血管壁的损伤:内皮损伤,内皮下基质(ECM)裸露
血流状态的改变:血流缓慢或涡流形成
血液性质的改变:高凝状态;血管内皮损伤;;;;纤溶酶原纤溶酶抑制物;1.兔体外血栓形成模型;造模方法:
Rabbitsanesthetizedwithintramuscularinjectionsof5mg/kgxylazine(甲苯噻嗪)and30mg/kgketaminehydrochloride,maintaineddilutedketamine(2mg/ml,IV)atarateof1.53mg/kg/hr
Mechanicalventilationviaatracheotomy
Bodytemperaturemonitoredwitharectalprobeandmaintainedat37°Cusingawater-jacketedheatingblanket.
Extracorporealcirculation(ECC,4hrs)bycannulatingtheleftcarotidarteryforECCinflowandleftfemoralvein(orrightexternaljugularvein)forECCoutflow
通过肌内注射5mg/kg赛拉嗪(甲苯噻嗪)和30mg/kg氯胺酮盐酸盐麻醉的兔子以1.53mg/kg/hr的速率维持稀释的氯胺酮(2mg/ml,IV)
通过机械通气行气管切开术
用直肠探针监测体温,并使用水套加热毯维持在37℃。
体外循环(ECC,4小时),通过插管用于ECC流入的左颈动脉和用于ECC流出的左股静脉(或右外颈静脉);15cm,1/4inch
polyurethanecatheter;PlateletaggregationusingaChrono-Logopticalaggregometer.
ObtainPRPandPPPbycentrifugation,100%lighttransmissionsetbyPPPand0%byPRP
;Flowcytometrydetection:
Plateletactivation
P-selectin(CD62P)expression,
ActivatedGPIIb/IIIa(fibrinogenreceptor)
Leukocyteactivation
MonocyteMAC-1(CD11b/CD18)andCD14
expressionNutrophilMAC-1andCD14expression
Platelet-leukocyteadhesion
Plateletmarker(CD61,CD42)andleukocytemarker
(CD11b),doublestained
流式细胞术检测:
???血小板活化
??????P-选择素(CD62P)表达,
??????活化GPIIb/IIIa(纤维蛋白原受体)
???白细胞活化
??????单核细胞MAC-1(CD11b/CD18)和CD14
??????表达NutrophilMAC-1和CD14表达
??血小板-白细胞粘附
??????血小板标志物(CD61,CD42)和白细胞标志物
??????(CD11b),双染
;Thrombusquantitation:
Circuitsremovedafter4hrsonECC
Rinsedwithnormalsaline
ResidualthrombusinthelargertubingofECC
photographed
ImagequantitatedusingImageJimagingsoftware
血栓定量:
??在ECC上4小时后,移除电路
??用生理盐水冲洗
??拍摄在ECC的较大管中的残余血栓
??使用ImageJ成像软件进行图像定量;Biomaterials.2010Apr;31(10):2736.;造模原理:
血小板接触粗糙面发生
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