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微生物的生理生化反应
v微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生
化反应
v把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生
理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢
过程和代谢的特点
v由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径
和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生
物分类鉴定的重要指标之一。
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淀粉水解实验
淀粉培养基淀粉培养基
接种
++
培养24h
变色圈，水解圈
加卢哥氏碘液
I-KI
+
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v结果：
v有水解圈—淀粉水解实验阳性，用+表示；
v无水解圈—淀粉水解实验阴性，用-表示；
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糖发酵实验
v原理：
v丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件
下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H2和
CO2——产酸产气
v缺少甲酸氢解酶——产酸不产气
v步骤：配制糖发酵培养基——接种——培养（约
24h)——观察结果
v结果：
v紫色无气泡，既不产酸也不产气用-表示；
v黄色无气泡，产酸不产气，用+表示；
v黄色且有气泡，产酸产气，用0表示。
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甲基红实验（M.R实验）
v原理
v微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸——pH下降——
加入指示剂甲基红——红色
v步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约24h)——
加入指示剂甲基红1~2滴——观察结果
v结果：
v红色——M.R实验阳性，用+表示；
v不变色——M.R实验阴性，用-表示；
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V.P实验
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V.P实验
v步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约
24h)——5~10d40%KOH,5~10d5%a-奈酚和
少量肌醇，取出塞子，用力震荡，保温（37
度15~30min）——观察结果
v结果：
v红色——V.P实验阳性，用+表示；
v不变色——V.P实验阴性，用-表示。
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实验内容
v以组为单位进行淀粉水解实验、糖发酵实验、V.P实验和
M.R实验。
v实验菌种：
v淀粉水解实验、糖发酵实验：大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌
vV.P实验和M.R实验：大肠杆菌、产气杆菌
v注意事项：
v实验报告：
v1、列表记录实验结果
v2、思考题：第4小题
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四大类细胞型微生物菌落的鉴定
v初步鉴定
v确证：显微镜观察
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微生物菌落特征的记录和描述
v菌落形态：形状，边缘情况
v大小：
v表面状况：湿润、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或
薄，是否粉末状
v质地：致密或疏松
v蔓延程度：
v与培养基结合程度
v颜色（正面、反面、边沿、中心）
v气味
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