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苛养菌及人畜共患病原菌第一节??????????苛养菌苛养菌：对营养要求苛刻，在普通培养基上不生长或难以生长的一类细菌。临床常见的有：G+球菌：肺炎链球菌G-球菌：卡他布兰汉菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌G-杆菌：嗜血杆菌、鲍特菌嗜血杆菌属嗜血杆菌属（Haemophilus）细菌为一类无动力、无芽孢的革兰阴性短小杆菌常呈球杆状、丝状等多形态。一、分类隶属巴斯德菌科，嗜血杆菌属。本菌属包括16个菌种，其中9个与临床有关。二、临床意义嗜血杆菌存在于正常人上呼吸道。可引起上呼吸道、泌尿道感染及脑膜炎、菌血症等感染性疾病。二、临床意义流感嗜血杆菌：常引起咽炎、中耳炎、肺炎、鼻炎、脑膜炎、心包炎、骨髓炎等。主要致病物质：内毒素、荚膜、菌毛和酶类。二、临床意义副流感嗜血杆菌：咽炎和心内膜炎。溶血嗜血杆菌：儿童上呼吸道感染。埃及嗜血杆菌：急性眼结膜炎。副嗜沫嗜血杆菌：心内膜炎、肺炎、脑膜炎。杜克嗜血杆菌：软下疳三、微生物特性培养特性：需氧或兼性厌氧最适生长温度：35℃PH7.6-7.8生长因子：X、V5%-10%CO2嗜血杆菌对生长因子的需求菌种X因子V因子溶血性流感嗜血杆菌++-副流感嗜血杆菌-+-埃及嗜血杆菌++-杜克嗜血杆菌+-+/-嗜沫嗜血杆菌+--溶血性嗜血杆菌+++三、微生物特性流感嗜血杆菌根据其对吲哚、脲酶及鸟氨酸试验的反应不同可分为8个生物型；副流感嗜血杆菌亦可分为8个生物型。三、微生物特性流感嗜血杆菌根据荚膜多糖抗原不同可分为a、b、c、d、e、f6个血清型，其中b型致病性最强，f次之。三、微生物特性流感嗜血杆菌含有不耐热的S抗原和耐热的R抗原。流感嗜血杆菌根据菌落特征可分为三种类型：粘液型（M）、光滑型（S）、粗糙型（R）。四、微生物检验

标本采集根据感染部位不同采集标本，如鼻咽试子，痰液，脑脊液，脓液等。避免干燥，及时送检。2.检验程序3.检验方法（1）直接镜检：痰液、脓液、鼻咽分泌物等标本可直接涂片，脑脊液离心取沉淀物涂片，革兰染色镜检。如查见革兰阴性短小杆菌，呈多形性，结合临床症状，作初步诊断。（2）分离培养：将血液、脑脊液增菌培养后，转种巧克力琼脂和血琼脂培养基，其他标本可直接划线接种于巧克力琼脂和血琼脂培养基，经35℃培养18～24h，根据菌落特征、菌体形态、溶血情况、卫星试验、X和V因子需求试验定种，再作生化试验和荚膜肿胀试验分型。卫星试验：挑取可疑菌落，密集划线接种于兔血琼脂平板和M.H琼脂平板上，再将金黄色葡萄球菌点种于培养基上，35℃，培养18～24h，如见金黄色葡萄球菌周围菌落较大，而远处菌落较小，即卫星试验阳性。（3）鉴定要点：本菌为革兰阴性短小杆菌，呈球杆状，逗点状，丝状等多形态性；在巧克力琼脂平板上为灰白色，中等大小、湿润的菌落；流感嗜血杆菌血平板卫星试验阳性，M-H琼脂平板卫星试验阴性；以X、V和X+V因子纸片贴于接种细菌的M-H琼脂平板上，仅在X+V因子周围生长为流感嗜血杆菌。（4）血清学试验：

①直接荧光抗体法首先将标本或培养物直接涂片，固定后用标记荧光素的流感嗜血杆菌抗血清染色，30min后，洗去多余血清，用荧光显微镜观察。此法可迅速得出结果