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pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（总共10题，每题2分）

1.PCR技术的基本原理是（B）。

A.DNA的复制

B.DNA的扩增

C.RNA的转录

D.蛋白的翻译

2.在PCR反应中，通常使用的引物长度为（C）。

A.10-15个核苷酸

B.15-20个核苷酸

C.20-30个核苷酸

D.30-40个核苷酸

3.PCR反应中，Taq酶的主要作用是（A）。

A.延伸DNA链

B.合成DNA引物

C.切割DNA链

D.聚合RNA链

4.PCR反应中，退火温度通常是根据（C）来确定的。

A.引物的长度

B.引物的GC含量

C.目标DNA的Tm值

D.反应缓冲液的pH值

5.PCR反应中，dNTPs的作用是（B）。

A.引物结合

B.DNA链的延伸

C.DNA的切割

D.RNA的合成

6.在PCR反应中，引物二聚体的形成通常发生在（A）。

A.退火阶段

B.延伸阶段

C.变性阶段

D.复性阶段

7.PCR反应中，镁离子（Mg2+）的作用是（C）。

A.引物结合

B.DNA的切割

C.Taq酶的激活

D.RNA的合成

8.在PCR反应中，循环次数通常为（B）。

A.10-20次

B.25-35次

C.40-50次

D.60-70次

9.PCR反应中，非特异性扩增的产物可以通过（A）来减少。

A.优化退火温度

B.增加引物浓度

C.增加Mg2+浓度

D.延长延伸时间

10.PCR反应中，凝胶电泳主要用于（B）。

A.DNA的复制

B.PCR产物的检测

C.RNA的转录

D.蛋白的翻译

二、多项选择题（总共10题，每题2分）

1.PCR反应的组成成分包括（ABCD）。

A.模板DNA

B.引物

C.dNTPs

D.Taq酶

2.PCR反应的三个主要步骤包括（ABC）。

A.变性

B.退火

C.延伸

D.复性

3.PCR反应中，影响退火温度的因素包括（ABCD）。

A.引物的长度

B.引物的GC含量

C.目标DNA的Tm值

D.反应缓冲液的离子强度

4.PCR反应中，可以用来检测PCR产物的方法包括（ABCD）。

A.凝胶电泳

B.荧光检测

C.序列分析

D.Southernblot

5.PCR反应中，可以用来减少非特异性扩增的方法包括（ABCD）。

A.优化退火温度

B.增加引物浓度

C.增加Mg2+浓度

D.优化PCR反应条件

6.PCR反应中，Taq酶的优缺点包括（AB）。

A.高温稳定性

B.缺乏3→5外切酶活性

C.需要高浓度的Mg2+

D.对引物依赖性强

7.PCR反应中，引物设计的原则包括（ABCD）。

A.引物长度为20-30个核苷酸

B.引物Tm值在55-65℃之间

C.引物之间没有互补区域

D.引物不含有二级结构

8.PCR反应中，可以用来提高PCR灵敏度的方法包括（ABCD）。

A.增加模板DNA浓度

B.增加引物浓度

C.增加dNTPs浓度

D.优化PCR反应条件

9.PCR反应中，可以用来提高PCR特异性的方法包括（ABCD）。

A.优化退火温度

B.增加引物浓度

C.增加Mg2+浓度

D.优化PCR反应条件

10.PCR反应中，可以用来检测PCR产物的方法包括（ABCD）。

A.凝胶电泳

B.荧光检测

C.序列分析

D.Southernblot

三、判断题（总共10题，每题2分）

1.PCR技术可以用于检测DNA序列中的单核苷酸多态性。（正确）

2.PCR反应中，引物的退火温度越高，非特异性扩增越少。（正确）

3.PCR反应中，Taq酶可以在低温下工作。（错误）

4.PCR反应中，dNTPs的浓度越高，PCR产物越多。（正确）

5.PCR反应中，Mg2+的浓度越高，PCR产物越多。（正确）

6.PCR反应中，循环次数越多，PCR产物越多。（正确）

7.PCR反应中，凝胶电泳可以用来检测PCR产物的长度。（正确）

8.PCR反应中，引物二聚体的形成会影响PCR产物的特异性。（正确）

9.PCR反应中，非特异性扩增的产物可以通过增加Mg2+浓度来减少。（错误）

10.PCR反应中，荧光检测可以实时监测PCR反应的进程。（正确）

四、简答题（总共4题，每题5分）

1.简述PCR反应的基本原理。

PCR反应的基本原理是利用DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板为模板，通过变性、退火、延伸三个步骤，特异性地扩增目标DNA片段。首先，高温变性使DNA双链分离，然后降低温度使引物与模板DNA结合，最后在Taq酶的作用下，以dNTPs为原料，延伸DNA链，从而实现DNA的扩增。

2.简述PCR