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以曙红Y为探针的荧光猝灭法定量分析壳寡糖

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蔡梓栋，黄媛，陈泳琳，王雅亭，白研

（广东药科大学公共卫生学院，广州510310）

摘要：建立基于荧光猝灭的定量分析壳寡糖（COS）的新方法。在pH=3.80的醋酸-醋酸钠缓冲溶液

中，壳寡糖质子化氨基与曙红（EY）通过静电引力结合形成高分子复合物，破坏了EY的分子内羟基短氢键

结构，导致荧光强度降低，曲拉通X-114（Tritonx-114）长链的聚氧乙烯结构和COS长链分子对EY发色

团的屏蔽作用，使EY-COS-Tritonx-114体系的荧光猝灭作用进一步增强。在一定浓度范围内，荧光的猝

灭程度与COS的浓度呈线性关系。基于此，建立了一种灵敏度高、简易可行的定量分析壳寡糖新方法。结

果：在优化的检测条件下，在0.10～3.00μg/mL范围内，ΔF与壳寡糖浓度存在良好的线性关系，回归方程为

ΔF=975.69c+68.742（c：μg/mL），R2=0.9966，检出限为39.83ng/mL。该法简便、快速、准确可靠，可用于

较为复杂样品中壳寡糖的含量测定。

关键词：壳寡糖；曙红Y；荧光猝灭法

中图分类号：TS207.3文献标识码：A文章编号：1006-2513（2024）2-0220-009

doi：10.19804/j.issn1006-2513.2024.2.027

Quantitativedeterminationofchito-oligosaccharideusingfluorescence

quenchingmethodwithEosinYasaprobe

CAIZidong，HUANGYuan，CHENYonglin，WANGYating，BAIYan*

（DepartmentofPublicHealth，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou510310）

Abstract：Toestablishamethodforquantitativeanalysisofchitosanoligosaccharides（COS）basedonfluorescence

quenchingmethod，inpH=3.80aceticacidsodiumacetatebuffersolution，theprotonatedaminogroupsofCOS

combinedwithEosinY（EY）throughelectrostaticattractiontoformapolymercomplex，disruptingtheintramolecular

hydroxylshorthydrogenbondstructureofEY，resultinginadecreaseinfluorescenceintensity.Theshieldingeffect

ofthelongchainpolyoxyethylenestructureofTritonX-114andCOSonEYchromophoresfurtherenhancedthe

fluorescencequenchingeffectoftheEY-COS-Tritonx-114system.Withinacertainconcentrationrange，thedegree

offluorescencequenchingwaslinearlyrelatedtotheconcentra