基于HPLC技术精准测定动物性食品中三氮脒与氯氰碘柳胺残留的研究.docxVIP

基于HPLC技术精准测定动物性食品中三氮脒与氯氰碘柳胺残留的研究

一、引言

1.1研究背景与意义

随着人们生活水平的提高，对动物性食品的需求日益增长，其质量与安全问题也愈发受到关注。兽药在动物养殖过程中被广泛应用，用于预防和治疗动物疾病，促进动物生长。然而，不合理使用兽药，如超剂量、超范围使用以及不遵守休药期等，导致动物性食品中兽药残留问题日益严重。兽药残留不仅会影响动物性食品的品质和风味，更重要的是对人类健康构成潜在威胁。长期摄入含有兽药残留的动物性食品，可能会导致人体产生耐药性、过敏反应、中毒以及“三致”（致癌、致畸、致突变）等危害，严重影响人们的身体健康。

三氮脒（Diminazene）作为一种在兽医临床上广泛应用的抗血液原虫药，能有效治疗家畜的梨形虫病、锥虫病等血液原虫病。但研究表明，泌乳奶牛在给药后第21天乳中仍有少量残留。我国已发布标准GB31650-2019中规定牛乳中三氮脒的最大残留限量为0.15mg/kg，牛肉中三氮脒的最大残留限量为0.5mg/kg，与FAO、WHO和欧盟的要求一致。若消费者长期食用三氮脒残留超标的动物性食品，可能会使人体病原菌产生耐药性，影响疾病治疗效果，还可能引发中毒等不良反应。

氯氰碘柳胺（Closantel）是一种高效、广谱的驱虫药，对牛羊等反刍动物的多种体内外寄生虫均有良好的驱杀作用。在进出口肉及肉制品的相关标准SN1628-2005中规定了其残留量的高效液相色谱测定方法，适用于牛肉、羊肉中氯氰碘柳胺残留量的检验，方法检出限为0.1mg/kg。然而，在实际养殖过程中，若不合理使用氯氰碘柳胺，同样会导致其在动物性食品中残留超标，危害消费者健康。

高效液相色谱（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）技术具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高等优点，在医药、化工、环境等领域都得到了广泛的应用，也是目前兽药残留检测的常用技术之一。建立准确、灵敏、可靠的HPLC检测方法，对于有效监测动物性食品中三氮脒和氯氰碘柳胺的残留量，保障动物性食品安全，维护人类健康具有重要意义。准确检测动物性食品中的兽药残留，能够为监管部门提供科学依据，加强对兽药使用的监管，规范养殖行为，从源头上保障动物性食品的质量安全，促进畜牧业的健康可持续发展。

1.2国内外研究现状

在国外，对动物性食品中兽药残留检测技术的研究开展较早，技术也相对成熟。对于三氮脒残留检测，一些研究采用固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）法，通过优化固相萃取条件和色谱分离条件，提高了检测的灵敏度和准确性。例如，[国外文献1]通过选择合适的固相萃取柱和洗脱液，有效去除了样品中的杂质，实现了对牛奶和牛肉中三氮脒残留的准确测定，定量限可达较低水平。在氯氰碘柳胺残留检测方面，[国外文献2]利用高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD）技术，针对不同动物组织样品，优化了提取和净化步骤，使方法的回收率和精密度满足检测要求，能够准确检测出动物源性食品中的氯氰碘柳胺残留。

国内对动物性食品中三氮脒和氯氰碘柳胺残留检测的研究也在不断深入。针对三氮脒，迪马科技参考GB31658.18-2022《食品安全国家标准动物性食品中三氮脒残留量的测定高效液相色谱法（征求意见稿）》，建立了SPE-HPLC法测定牛奶和牛肉中三氮脒残留量，通过ProElutPWC净化，DiamonsilPlusC18色谱柱分离检测，定量限与标准方法一致，该方案具有回收率高、净化效果优异、方法稳定性好等优点。对于氯氰碘柳胺，有研究对牛、羊肉中氯氰碘柳胺残留的检测方法进行了研究，取动物组织样品用乙腈提取，正己烷脱脂，经过氧化铝B柱净化后，用带有紫外检测器的高效液相色谱仪于221nm波长处测定，流动相为乙腈∶水（85∶15），该方法也取得了较好的检测效果。

然而，现有研究仍存在一些不足之处。部分检测方法的前处理过程较为繁琐，需要耗费大量的时间和试剂，不利于快速检测。不同研究中采用的色谱柱、流动相以及检测条件等存在差异，导致方法的通用性和可比性较差。对于一些复杂基质的动物性食品，如动物内脏等，现有的检测方法在净化效果和检测灵敏度方面还有待提高。在实际检测过程中，多种兽药残留同时存在的情况较为常见，而目前针对三氮脒和氯氰碘柳胺与其他兽药多残留检测的研究相对较少。

1.3研究目标与内容

本研究旨在建立一种准确、灵敏、可靠的高效液相色谱（HPLC）检测方法，用于测定动物性食品中三氮脒及氯氰碘柳胺的残留量。具体研究内容包括：

建立HPLC检测方法：通过对色谱柱、流动相组成、流速、柱温、检测波长等色谱条件的优化，确定最佳的HPLC分析条件，使