酶促反应动力学 (2).pptVIP

将已知数据代入上式中，求得min-1、当t=3min时，可以求得mol/lxS=6%mol/l第29页，共84页，星期日，2025年，2月5日（2）当[S0]为1×10-6mol/l时，仍可视为一级反应，∴t=3min时，同样可求得xS=6%mol/lmol/l第30页，共84页，星期日，2025年，2月5日3）据得mol/l·min第31页，共84页，星期日，2025年，2月5日（1）米氏常数的意义①是酶的一个特性常数：的大小只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。值随测定的底物浓度、反应的温度、pH及离子强度而改变。②根据km值可以推断酶和底物的亲和力。如果酶的专一性不高，可催化几种底物发生反应时，km值最小的就表示酶与这一底物的亲和力最大，反之，则最小。（三）动力学参数的意义第32页，共84页，星期日，2025年，2月5日③根据km值，可以估计胞内基质浓度，如时，。那么只要稍微改变基质浓度，的变化就很大，即反应速率对基质浓度改变的敏感性很大，如果或时，基质浓度相差1000倍，但反应速率只增加一倍，即在生理上保持是没有意义的。第33页，共84页，星期日，2025年，2月5日④若已知某个酶的Km值，就可以计算出在某一底物浓度时，其反应速率相当于Vmax的百分率。⑤Km值可以帮助推断某一代谢反应的方向和途径。催化可逆反应的酶，对正逆两向底物的Km不同。第34页，共84页，星期日，2025年，2月5日Km可以帮助推断某一反应的方向和途径乳酸脱氢酶乳酸丙酮酸脱氢酶乙酰CoA丙酮酸脱羧酶乙醛Km=1.7x10-5mol/LKm=1.3x10-3mol/LKm=1.0x10-3mol/L丙酮酸第35页，共84页，星期日，2025年，2月5日（2）Vmax和K3(Kcat)的意义在一定的酶浓度下，酶对特定底物的Vmax也是一个常数。当[s]很大时，Vmax=K3『E]。Vmax与K3成线性关系，而直线的斜率为K3。K3表示当酶被底物饱和时每秒钟每个酶分子转换底物的分子数，这个常数又叫转换数（简称TN)，通称催化常数（catalyticconstant,kcat).Kcat值越大，表示酶的催化效率越高。第36页，共84页，星期日，2025年，2月5日四、酶动力学图解法要建立一个完整的动力学方程，必须通过动力学实验确定其动力学参数。对Michaelis-Menten方程，就是要确定rmax（或k+2）和km值。但直接应用Michaelis-Menten方程求取动力学参数所遇到的主要困难在于该方程为非线性方程。为此常将该方程加以线性化，通过作图法直接求取动力学参数。第37页，共84页，星期日，2025年，2月5日1.双倒数图解法（LineweaverBurk图解）双倒数1Km11???=??????+??VVmax