解析CCTγ在BGC-823细胞中的功能及其与TFF3的关联：胃癌研究新视角.docxVIP

解析CCTγ在BGC-823细胞中的功能及其与TFF3的关联：胃癌研究新视角

一、引言

1.1研究背景与意义

胃癌作为全球范围内常见的癌症之一，其发病率和死亡率仍然较高，是严重威胁人类健康的重大疾病之一。在中国，每年新发胃癌病例数占全球新发病例数的近一半，且多数患者确诊时已处于中晚期，治疗难度大，死亡率显著增加。早期胃癌患者手术治疗后的5年生存率超过90％，而晚期胃癌患者的生存期往往不超过1年，因此提高胃癌的早期诊断率和治疗效果是当前亟待解决的问题。

癌症的发生是一个多基因、多阶段、渐进性进行的复杂过程，涉及细胞凋亡、增殖调控等多种生物学过程的异常。TFF3（三叶因子3）是主要由胃肠道黏膜分泌的一种小分子粘膜分泌蛋白，在胃肠道黏膜保护中发挥关键作用，可维护上皮细胞的生理功能，在细胞损伤和炎症时具有保护和修复上皮组织的作用。近年来，TFF3在肿瘤形成中的作用逐渐成为研究热点，已有研究表明，TFF3在胃癌组织中的表达明显增加，与肿瘤分化程度、淋巴结转移和预后有关，其高表达时肿瘤的侵袭性和转移风险升高，还可通过激活PI3K/AKT和MAPK等信号通路，促进肿瘤细胞的增殖和生存。

CCT（伴侣蛋白TCP-1环状复合物）是真核生物细胞质中唯一的伴侣素，主要功能是帮助新生的蛋白质多肽链完成正确折叠，以发挥相应功能。目前已知其结合底物有肌动蛋白、微管蛋白等。近年来研究发现，各种恶性肿瘤中CCT的表达明显升高，推测其在肿瘤的发生发展中也发挥着一定功能。其中，CCTγ作为CCT的一个亚基，其在肿瘤中的具体生物学功能及作用机制尚未完全明确。

本实验组前期通过酵母双杂交的方法正反向验证了TFF3和CCTγ二者的结合，基于此，本研究猜测TFF3是否在CCTγ的协助下折叠成具有三叶草结构的小分子肽，进而促进胃癌的发生发展。本研究首次在胃癌细胞系BGC-823中从分子生物学水平对二者结合性进一步探讨，并初步研究CCTγ对胃癌细胞生物学功能的影响，不仅有助于进一步明确TFF3和CCTγ的相互关系，还能为深入了解胃癌的发病机制提供新的视角，为胃癌的靶向治疗提供新的方向和潜在靶点，具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2国内外研究现状

在国外，对CCTγ的研究相对较为深入，已有研究揭示了CCTγ在蛋白质折叠过程中的分子机制，并且发现其在一些肿瘤细胞系中的异常表达与肿瘤细胞的增殖、迁移等生物学行为相关。例如，有研究通过基因编辑技术敲除或过表达CCTγ，观察到肿瘤细胞的生长和转移能力发生明显变化。对于TFF3，国外也进行了大量研究，明确了其在胃肠道黏膜保护和修复中的重要作用，以及在多种肿瘤，如乳腺癌、结肠癌等中的致癌作用机制，发现TFF3可以通过多种信号通路调控肿瘤细胞的生物学行为。关于CCTγ与TFF3的关系，国外有少量研究提示二者可能存在相互作用，但具体的作用方式和生物学意义尚未完全阐明。

在国内，相关研究也在逐步开展。在CCTγ方面，有研究关注其在神经细胞等非肿瘤细胞中的功能，以及在一些肿瘤组织中的表达情况，但对于其在胃癌细胞中的生物学功能研究较少。对于TFF3在胃癌中的研究，国内主要集中在其表达水平与胃癌临床病理特征的相关性分析，以及探索其作为胃癌诊断标志物和治疗靶点的可能性。关于CCTγ与TFF3在胃癌细胞中的关系研究则处于起步阶段，仅有少数研究通过初步实验验证了二者的结合，但缺乏对其功能和机制的深入探讨。

综合国内外研究现状，虽然对CCTγ和TFF3各自的功能以及在肿瘤中的作用有了一定的认识，但对于CCTγ在BGC-823细胞中的生物学功能及与TFF3的关系研究还存在许多不足。目前仍不清楚CCTγ是否通过影响TFF3的折叠或其他机制来调控胃癌细胞的生物学行为，也缺乏对二者相互作用的具体分子机制的深入研究。因此，开展本研究具有重要的必要性和迫切性。

1.3研究目的与创新点

本研究旨在深入探讨CCTγ在BGC-823细胞中的生物学功能，以及其与TFF3之间的相互关系，具体包括以下几个方面：首先，通过构建相关质粒，利用免疫荧光共聚焦技术和免疫共沉淀方法，进一步验证CCTγ与TFF3在细胞中的共定位和结合情况；其次，构建CCTγ的干扰质粒并稳定转染BGC-823细胞，运用多种实验技术，如划痕实验、Transwell小室实验、CCK-8及流式细胞计数技术等，分析CCTγ干扰细胞株的迁移、侵袭、增殖能力及凋亡水平的变化，从而明确CCTγ在胃癌细胞中的生物学作用；最后，探究CCTγ对TFF3表达和功能的影响，初步揭示二者在胃癌发生发展过程中的潜在作用机制。

本研究的创新点