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环境工程微生物学2025菌种鉴定专项卷

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。请将正确选项前的字母填在题干后的括号内）

1.在进行微生物纯种分离时，选择使用划线接种法的主要目的是（）。

A.观察微生物的群体形态

B.获得单个菌落

C.加快微生物的生长速度

D.增加接种量以提高成活率

2.某环境样品中存在好氧和厌氧微生物，若需同时分离这两种类型的微生物，应选择的培养方法是（）。

A.非选择性培养

B.选择性培养

C.增菌培养

D.均匀培养

3.根据革兰氏染色结果，某菌落呈革兰氏阴性，其主要细胞壁特征是（）。

A.含有大量脂多糖和肽聚糖，外层有荚膜

B.含有少量脂多糖和较厚肽聚糖层，无外膜

C.含有大量脂多糖和较薄肽聚糖层，外层有外膜

D.仅含少量肽聚糖，无细胞壁

4.在鉴定未知菌种时，以下哪项生理生化试验结果通常不具有特异性？（）

A.麦芽糖发酵试验

B.氧化酶试验

C.硝酸盐还原试验

D.赖氨酸脱羧酶试验

5.使用显微镜观察细菌时，若视野模糊，应调节（）。

A.聚焦环（粗准焦螺旋或细准焦螺旋）

B.光圈大小

C.目镜转换器

D.物镜转换器

6.对于难以培养或生长缓慢的环境微生物，常用的分子生物学鉴定方法是（）。

A.传统的平板计数法

B.商业化的生化鉴定系统

C.直接从环境样品中提取DNA进行序列分析

D.纯培养后的菌落形态观察

7.16SrRNA基因序列分析在菌种鉴定中的主要优势在于（）。

A.可直接测定细胞外激素

B.可快速获得物种水平上的遗传信息

C.能精确反映菌种的代谢活性

D.操作简单，无需特殊设备

8.在进行水体中总磷测定时，若发现样品出现颜色沉淀，可能的原因是（）。

A.磷酸盐含量过高

B.存在干扰离子（如钼酸铵沉淀）

C.试剂配制错误

D.样品保存不当导致沉淀

9.基于高通量测序技术的微生物群落分析，其主要目的是（）。

A.鉴定环境样品中的所有微生物种类

B.精确计算样品中每种微生物的绝对数量

C.评估微生物群落的结构和功能多样性

D.获得单个微生物的完整基因组序列

10.在评估一个生物修复工艺的效果时，监测关键功能微生物的种群动态比监测总微生物量更有意义，这是因为（）。

A.总微生物量更能反映环境胁迫程度

B.功能微生物直接参与环境物质转化

C.功能微生物数量总是远高于其他微生物

D.功能微生物的形态更易于观察

二、填空题（每空2分，共20分。请将答案填在题干横线上）

1.鉴定未知菌种时，形态学观察主要包括______和______两个方面。

2.选择性培养基通过加入特定物质，抑制______的生长，同时促进______的生长。

3.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的主要区别在于肽聚糖层的厚度和______的存在与否。

4.测定水中细菌总数常用的培养法是______法，它适用于测定水样中______的微生物。

5.分子生物学鉴定技术中，基于DNA序列比对的系统发育树构建，可以反映不同菌株之间的______关系。

6.在进行微生物生理生化试验时，确保试验结果的准确性，必须严格控制______和______等实验条件。

7.环境工程中，利用光合细菌处理垃圾渗滤液，主要是利用其______能力。

8.菌种保藏的目的是为了长期保存菌种的______和______。

9.PCR技术在微生物鉴定中主要利用了______的特异性结合原理。

10.基于荧光染料的微生物直接计数法（如______法）可以直接测定样品中微生物的总数量。

三、名词解释（每小题3分，共12分。请给出简洁、准确的定义）

1.菌落形态

2.选择性培养基

3.16SrRNA基因

4.功能微生物

四、简答题（每小题5分，共20分）

1.简述革兰氏染色的基本步骤及其原理。

2.列举三种常用的选择性培养基，并说明其主要用于分离哪种类型的微生物。

3.简述分子生物学鉴定方法（如16SrRNA基因序列分析）相比传统生化方法的主要优点。

4.在环境工程实践中，进行菌种鉴定的主要意义有哪些？

五、综合应用题（每小题10分，共20分）

1.某城市污水处理厂曝