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基于RNA-seq解析高糖诱导血管内皮细胞“代谢记忆”的分子密码

一、引言

1.1研究背景与意义

糖尿病作为一种全球性的公共卫生问题，其发病率和患病率呈逐年上升趋势。国际糖尿病联盟（IDF）数据显示，2021年全球约有5.37亿成年人患有糖尿病，预计到2045年这一数字将增长至7.83亿。在中国，糖尿病患者人数已超1.4亿，居世界首位。糖尿病的主要危害不仅在于高血糖本身，更在于其引发的各种慢性并发症，如糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病心脑血管疾病等，这些并发症严重影响患者的生活质量，增加致残率和死亡率。

“代谢记忆”现象的发现，进一步揭示了糖尿病慢性并发症防治的复杂性。代谢记忆是指在高血糖状态下，即使后续血糖得到良好控制，之前高血糖对组织器官造成的损伤仍会持续进展。例如，英国前瞻性糖尿病研究（UKPDS）表明，早期强化血糖控制可使糖尿病患者在后续10年中微血管并发症风险持续降低，即便后期血糖控制水平相似，早期强化治疗组的获益依然存在。这充分说明，高血糖的不良影响会在体内留下“记忆”，对血管等组织产生长期的病理改变。

血管内皮细胞作为血管壁与血液之间的重要屏障，在维持血管稳态中发挥着关键作用。正常情况下，血管内皮细胞通过分泌多种生物活性物质，如一氧化氮（NO）、前列环素等，调节血管舒张、抑制血小板聚集和炎症反应。然而，在糖尿病高糖环境下，血管内皮细胞功能受损，这被认为是糖尿病血管并发症发生发展的始动环节。高糖可通过多种机制诱导血管内皮细胞损伤，如氧化应激增加、多元醇通路激活、蛋白激酶C（PKC）途径活化等，导致内皮细胞分泌功能紊乱、细胞凋亡增加、通透性改变以及促炎和促凝因子表达上调，进而促进动脉粥样硬化等血管病变的发生。

深入研究高糖诱导血管内皮细胞代谢记忆的机制，对于理解糖尿病血管并发症的发病机制具有重要的理论意义。从临床实践角度看，目前糖尿病血管并发症的治疗手段有限，主要以控制血糖、血压、血脂等危险因素为主，但即便如此，仍无法完全阻止并发症的进展。若能明确代谢记忆的关键分子机制，将为开发新的治疗靶点和干预策略提供理论依据，有望打破代谢记忆的“枷锁”，有效预防和治疗糖尿病血管并发症，改善患者的预后和生活质量，具有重要的临床应用价值和社会经济效益。

1.2国内外研究现状

在高糖与血管内皮细胞关系的研究方面，国内外学者已取得了丰硕的成果。研究证实，高糖环境会导致血管内皮细胞功能障碍，表现为一氧化氮（NO）释放减少、内皮素-1（ET-1）分泌增加，从而引起血管舒缩功能异常。高糖还能激活氧化应激途径，使活性氧（ROS）生成增多，损伤血管内皮细胞的结构和功能。国内学者通过细胞实验发现，高糖可诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡，且这一过程与线粒体功能障碍密切相关。国外研究则表明，高糖环境下血管内皮细胞的紧密连接蛋白表达下降，导致血管通透性增加，促进炎症细胞浸润。

对于代谢记忆的研究，国外起步较早，已在多个领域展开深入探索。在糖尿病视网膜病变研究中，发现高糖诱导的代谢记忆与表观遗传修饰如DNA甲基化、组蛋白修饰等密切相关。这些修饰可改变相关基因的表达，导致视网膜血管内皮细胞持续受损。国内研究也在跟进，有团队通过动物实验证实，糖尿病肾病中存在代谢记忆现象，高糖引起的肾脏系膜细胞增殖和细胞外基质堆积在血糖控制后仍会持续进展，可能与转化生长因子-β（TGF-β）信号通路的持续激活有关。

近年来，RNA测序（RNA-seq）技术在生命科学领域得到广泛应用，为研究高糖诱导血管内皮细胞代谢记忆机制提供了新的有力工具。国外有研究运用RNA-seq技术分析糖尿病小鼠血管内皮细胞的转录组变化，筛选出一批与代谢记忆相关的差异表达基因，涉及氧化应激、炎症反应、细胞周期调控等多个生物学过程。国内也有学者利用该技术对高糖处理的人血管内皮细胞进行研究，发现了一些新的潜在调控基因和信号通路。

然而，当前研究仍存在诸多不足。一方面，虽然已发现一些与代谢记忆相关的基因和信号通路，但这些分子之间的相互作用网络尚未完全明确，难以全面揭示代谢记忆的调控机制。另一方面，现有的研究大多集中在细胞和动物水平，缺乏临床样本的验证，使得研究成果向临床应用的转化受到限制。此外，针对代谢记忆的干预措施研究较少，且效果不尽人意，迫切需要寻找新的治疗靶点和干预策略。

1.3研究目标与内容

本研究旨在利用RNA-seq技术，深入探究高糖诱导血管内皮细胞代谢记忆的分子机制，为糖尿病血管并发症的防治提供新的理论依据和潜在治疗靶点。具体研究内容如下：

高糖诱导血管内皮细胞代谢记忆模型的建立与验证：通过体外细胞实验，将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）分别置于正常糖浓度和高糖浓度环境中培养，建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模