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临床基因扩增检验技术人员PCR上岗证培训考试试题及答案

一、单选题

1.PCR反应中，TaqDNA聚合酶的作用是（）

A.使DNA双链解链

B.使引物与模板DNA结合

C.合成新的DNA链

D.水解引物

答案：C

解析：TaqDNA聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶，在PCR反应中，它的主要作用是在引物的引导下，以单链DNA为模板，按照碱基互补配对原则合成新的DNA链。选项A中使DNA双链解链是通过高温实现的；选项B引物与模板DNA结合是通过退火过程实现的；选项DTaqDNA聚合酶没有水解引物的作用。

2.下列哪种物质不是PCR反应所必需的（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTP

D.蛋白酶

答案：D

解析：PCR反应需要模板DNA提供扩增的起始序列，引物用于引导DNA聚合酶开始合成新链，dNTP是合成DNA的原料。而蛋白酶在PCR反应中没有作用，它主要用于蛋白质的水解等过程，不是PCR反应必需的物质。

3.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.连接

答案：D

解析：PCR反应的基本步骤包括变性、退火和延伸。变性是将双链DNA在高温下解链为单链；退火是使引物与单链模板DNA结合；延伸是在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料合成新的DNA链。连接通常是指DNA连接酶将两段DNA连接起来的过程，不属于PCR反应的基本步骤。

4.实时荧光定量PCR技术中，SYBRGreenI荧光染料的作用是（）

A.特异性结合引物

B.特异性结合模板DNA

C.嵌入双链DNA中发出荧光

D.与单链DNA结合发出荧光

答案：C

解析：SYBRGreenI是一种荧光染料，它能嵌入到双链DNA的小沟中，当有双链DNA存在时，SYBRGreenI结合到双链DNA上并发出荧光，通过检测荧光信号的强度可以实时监测PCR反应中双链DNA的扩增情况。它不是特异性结合引物或模板DNA，也不与单链DNA结合发出荧光。

5.在PCR实验室中，防止污染的措施不包括（）

A.分区操作

B.严格的人员培训

C.使用一次性耗材

D.增加实验次数

答案：D

解析：在PCR实验室中，分区操作可以将不同的实验步骤分开，避免交叉污染；严格的人员培训可以使操作人员掌握正确的实验操作方法，减少污染的可能性；使用一次性耗材可以避免重复使用带来的污染。而增加实验次数并不能防止污染，反而可能因为操作次数的增加而增加污染的风险。

6.下列关于引物设计的原则，错误的是（）

A.引物长度一般为18-25个核苷酸

B.引物的GC含量应在40%-60%之间

C.引物3’端可以有连续的3个G或C

D.引物应避免形成二级结构

答案：C

解析：引物3’端应避免有连续的3个G或C，因为这样可能会导致引物与模板非特异性结合，增加非特异性扩增的可能性。引物长度一般为18-25个核苷酸，这样可以保证引物的特异性和结合效率；引物的GC含量在40%-60%之间有助于维持引物的稳定性；引物应避免形成二级结构，否则会影响引物与模板的结合。

7.PCR反应中，退火温度的确定主要取决于（）

A.引物的长度

B.引物的GC含量

C.模板DNA的长度

D.模板DNA的GC含量

答案：B

解析：退火温度主要取决于引物的GC含量。引物的GC含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性越强，所需的退火温度就越高。引物的长度也会对退火温度有一定影响，但不是主要因素；模板DNA的长度和GC含量对退火温度的影响相对较小。

8.下列哪种疾病可以通过PCR技术进行诊断（）

A.高血压

B.糖尿病

C.乙型肝炎

D.关节炎

答案：C

解析：PCR技术可以用于检测病原体的核酸，从而诊断感染性疾病。乙型肝炎是由乙肝病毒感染引起的，通过PCR技术可以检测血液中乙肝病毒的DNA，从而进行诊断。高血压和糖尿病主要是由多种因素引起的代谢性疾病，一般不通过PCR技术诊断；关节炎的病因复杂，也不是主要通过PCR技术诊断。

9.在PCR反应中，循环次数过多可能会导致（）

A.产物量过少

B.非特异性扩增增加

C.引物耗尽

D.模板DNA降解

答案：B

解析：循环次数过多时，由于反应体系中各种因素的影响，如引物与模板的非特异性结合等，会导致非特异性扩增增加。循环次数过多一般会使产物量增加而不是过少；引物耗尽和模板DNA降解不是循环次数过多的主要后果。

10.下列关于PCR产物检测的方法，错误的是（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.质谱分析

D.比色法

答案：D

解析：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是常用的PCR产物检测方法，通过电泳可以根据产物的大小对其进行分离和检测。质谱