河北省pcr考试题库及答案.docVIP

河北省pcr考试题库及答案

一、单项选择题（总共10题，每题2分）

1.PCR技术的全称是？

A.聚合酶链式反应

B.聚合酶链式复制

C.聚合酶链式转录

D.聚合酶链式翻译

答案：A

2.PCR反应中，引物的作用是？

A.催化DNA合成

B.模板链

C.引导DNA合成

D.分解DNA

答案：C

3.PCR反应中，常用的DNA聚合酶是？

A.RNA聚合酶

B.蛋白酶

C.聚合酶Taq

D.聚合酶EcoRI

答案：C

4.PCR反应的退火温度通常是多少？

A.50-65℃

B.60-75℃

C.70-85℃

D.80-95℃

答案：B

5.PCR反应中，dNTPs指的是？

A.DNA聚合酶

B.DNA模板

C.DNA引物

D.脱氧核糖核苷三磷酸

答案：D

6.PCR反应中，哪个步骤是变性？

A.引物退火

B.DNA合成

C.DNA变性

D.退火

答案：C

7.PCR反应中，哪个步骤是延伸？

A.DNA变性

B.引物退火

C.DNA合成

D.退火

答案：C

8.PCR反应中，哪个步骤是退火？

A.DNA变性

B.引物退火

C.DNA合成

D.延伸

答案：B

9.PCR反应中，哪个因素会影响PCR的特异性？

A.引物长度

B.退火温度

C.DNA模板质量

D.以上都是

答案：D

10.PCR反应中，哪个因素会影响PCR的效率？

A.引物浓度

B.DNA聚合酶浓度

C.dNTPs浓度

D.以上都是

答案：D

二、填空题（总共10题，每题2分）

1.PCR技术的全称是聚合酶链式反应。

2.PCR反应中，引物的作用是引导DNA合成。

3.PCR反应中，常用的DNA聚合酶是Taq聚合酶。

4.PCR反应的退火温度通常在60-75℃之间。

5.PCR反应中，dNTPs指的是脱氧核糖核苷三磷酸。

6.PCR反应中，变性步骤是将双链DNA分离成单链。

7.PCR反应中，延伸步骤是DNA聚合酶在引物指导下合成新的DNA链。

8.PCR反应中，退火步骤是引物与单链DNA结合。

9.PCR反应中，影响PCR特异性的因素包括引物长度、退火温度和DNA模板质量。

10.PCR反应中，影响PCR效率的因素包括引物浓度、DNA聚合酶浓度和dNTPs浓度。

三、判断题（总共10题，每题2分）

1.PCR技术可以用于检测DNA序列。

2.PCR反应中，引物是必需的。

3.PCR反应中，DNA聚合酶是必需的。

4.PCR反应的退火温度越高，特异性越好。

5.PCR反应中，dNTPs是DNA合成的原料。

6.PCR反应中，变性步骤是高温处理。

7.PCR反应中，延伸步骤是低温处理。

8.PCR反应中，退火步骤是中温处理。

9.PCR反应的特异性受引物设计的影响。

10.PCR反应的效率受多种因素影响。

答案：1.正确2.正确3.正确4.错误5.正确6.正确7.错误8.正确9.正确10.正确

四、简答题（总共4题，每题5分）

1.简述PCR反应的基本步骤。

答：PCR反应的基本步骤包括变性、退火和延伸。变性是将双链DNA分离成单链，退火是引物与单链DNA结合，延伸是DNA聚合酶在引物指导下合成新的DNA链。

2.PCR反应中，引物设计需要注意哪些问题？

答：PCR反应中，引物设计需要注意引物长度、退火温度、特异性、二级结构等因素。引物长度通常在18-25个碱基之间，退火温度在55-65℃之间，特异性要高，避免二级结构形成。

3.PCR反应中，影响PCR特异性的因素有哪些？

答：PCR反应中，影响PCR特异性的因素包括引物长度、退火温度和DNA模板质量。引物长度越长，特异性越高；退火温度越高，特异性越好；DNA模板质量越高，特异性越好。

4.PCR反应中，影响PCR效率的因素有哪些？

答：PCR反应中，影响PCR效率的因素包括引物浓度、DNA聚合酶浓度和dNTPs浓度。引物浓度要适宜，过高或过低都会影响效率；DNA聚合酶浓度要适宜，过高或过低都会影响效率；dNTPs浓度要适宜，过高或过低都会影响效率。

五、解决问题（总共4题，每题5分）

1.某PCR反应中，引物退火温度为60℃，但PCR产物特异性差，如何提高特异性？

答：可以尝试提高退火温度，一般退火温度越高，特异性越好。可以尝试调整引物设计，选择特异性更高的引物。

2.某PCR反应中，PCR产物量少，如何提高效率？

答：可以尝试增加引物浓度、DNA聚合酶浓度和dNTPs浓度。可以尝试优化PCR反应条件，如调整退火温度、延伸时间等。

3.某PCR反应中，PCR产物中出现非特异性条带，如何减少非特异性条带？

答：可以尝试降低退火温度，一般退火温度越低，