珊瑚共附生嗜盐单胞菌原噬菌体上的HicAB毒素–抗毒素系统的鉴定及其结构分析.pdfVIP

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热带海洋学报JOURNALOFTROPICALOCEANOGRAPHY2025年第44卷第6期:120–131

doi:10.11978/2025022CSTR:32234.14.2025022

珊瑚共附生嗜盐单胞菌原噬菌体上的HicAB毒素–抗毒素系

统的鉴定及其结构分析

1,2222

张雨,刘自尧,王晓雪,陈冉

1.暨南大学生命科学技术学院,广东广州510632;

2.中国科学院南海海洋研究所,热带海洋生物资源与生态重点实验室,广东广州511458

摘要:噬菌体与细菌宿主的相互作用对珊瑚健康和珊瑚礁稳定性具有重要影响,也是病毒学领域的研究热点之一。为应对噬

菌体的感染压力,细菌进化出多种固有和适应性免疫系统,其中毒素–抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统是重要的防御机制之

一。本研究通过生物信息学分析预测,珊瑚共附生嗜盐单胞菌HalomonasmeridianaSCSIO43005(Hm43005)所携带的原噬

菌体Phm2中的CTT34_05265和CTT34_05260基因分别编码HmHicA和HmHicB蛋白,并通过大肠杆菌生长实验证实其构

成TA系统。Pull-down和细菌双杂交实验进一步验证了HmHicA与HmHicB之间的相互作用。凝胶迁移阻滞实验

(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)和DNaseⅠ足迹实验表明,HmHicB通过特异性结合hicAB启动子-35区上游和-10

区的回文序列,发挥转录自调控功能。此外,HmHicB单独表达对宿主表现出轻微毒性,提示抗毒素蛋白在细胞内可能具有其

他调控靶点。结构分析显示,HmHicA具有核糖体非依赖性RNA切割酶活性,而HmHicB包含N端毒素结合结构域和C端

DNA结合结构域。HmHicB通过C端形成同源二聚体,并与HmHicA以2:2的化学计量比形成复合物。HmHicA带正电荷

的活性口袋与HmHicB带负电荷的毒素结合结构域之间的相互作用,以及HmHicAHis24活性位点的包埋,可能是抗毒素抑

制毒素活性的分子机制。这些研究结果为深入解析该TA系统的性质及其生理生态功能奠定了重要基础。

关键词:珊瑚共附生细菌;嗜盐单胞菌;毒素–抗毒素系统;HicAB系统

中图分类号:Q939.9文献标识码:A文章编号:1009-5470(2025)06-0120-12

IdentificationandstructuralanalysisoftheHicABtoxin-antitoxinsystemencodedby

aprophageincoral-associatedHalomonasmeridiana

1,2222

ZHANGYu,LIUZiyao,WANGXiaoxue,CHENRan

1.CollegeofLifeScienceandTechnology,JinanUniversity,Guangzhou510632,China;

2.KeyLaboratoryofTropicalMarineBio-resourcesandEcology,SouthChinaSeaInstituteofOceanology,ChineseAcademyofSciences,

Guangzhou511458,China

Abstract:Theinteractionbetweenphagesandbacterial

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