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中国农业科学2024,57(12):2282-2294
ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2024.12.002
开放科学(资源服务)标识码(OSID):
芝麻籽粒植酸含量高通量检测方法的建立与低植
酸种质的筛选
1,2112121
杨茜,游均,周瑢,方圣,张艳欣,吴自明,王林海
12
中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,武汉430062;江西农业大学作物生理生态与遗传育种教育
部重点实验室,南昌330045
摘要:【目的】植酸是芝麻中主要的抗营养成分之一。探究芝麻籽粒植酸高效提取最优条件,建立植酸含量高通量检测方法,
并应用于芝麻群体材料植酸含量变异检测和低植酸种质资源筛选,推动芝麻植酸基础研究和低植酸品种选育。【方法】以0.4
mol·L-1HCl为提取溶剂,进行种子量、捣碎时间、捣碎频率、提取液体积等单因素试验,对芝麻籽粒植酸进行提取,结合微
量化铁沉淀法高通量测定植酸含量。在单因素试验的基础上,进行Box-Behnken四因素三水平的响应面试验,建立植酸得率
为响应值的二次多项式回归方程模型,并绘制响应曲面图和等高线图,分析影响植酸得率的主要因素及各因素间的交互作用,
确定植酸含量检测的最优提取条件。利用该参数条件对2个环境下种植的200份芝麻种质资源进行植酸含量测定,筛选低植
酸种质。【结果】方差分析显示,建立的回归模型具有高度显著性(P<0.0001),失拟项不显著(P>0.05),方程对试验拟
合较好,可用此回归方程对芝麻籽粒植酸提取试验进行优化。4个因素的一次项对植酸得率的影响均达到极显著水平,对植
酸得率的影响大小依次为种子量>捣碎时间>捣碎频率>提取液体积。响应面分析图表明,种子量和捣碎时间、种子量和捣
碎频率、捣碎时间和捣碎频率、捣碎时间和提取液体积、捣碎频率和提取液体积之间具有一定的交互作用。经过单因素条件
及响应面设计优化的植酸最佳提取条件参数为种子量30mg、捣碎时间6.5min、捣碎频率50Hz、提取液体积435μL,在
此条件下的植酸得率预测值为14.03mg·g-1-1
,实际植酸平均得率为14.14mg·g,模型预测值与试验实际值十分接近。从200
份种质资源中筛选出3份稳定的低植酸芝麻种质,平均含量为11.63mg·g-1。【结论】建立了芝麻植酸高效提取检测技术,可
以显著减少试验时长,减少样品使用量,检测结果重复性好,准确性高。
关键词:芝麻;植酸;提取工艺;响应面分析法;种质筛选
EstablishmentofHigh-ThroughputDetectionMethodforPhytic
AcidContentinSesameSeedsandScreeningofLowPhyticAcid
Germplasms
1,2112121
YANGXi,YOUJun,ZHOURong,FANGSheng,ZHANGYanXin,WUZiMing,WANGLinHai
1OilCropsResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences/KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementof
OilCrops,MinistryofAgricultureandRuralAffairs,Wuhan43006
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