微生物监测法郭光玲98课件讲解.pptxVIP

微生物监测法主讲人：郭光玲

生物监测技术

土壤污染生物监测方法

微生物监测法某一化工园区长期排放各类污染物，对周边土壤环境产生了潜在影响，研究人员在园区周边不同距离的农田采集土壤样本，分别进行微生物监测分析，结果发现，随着与化工园区距离的缩短，土壤中微生物的数量和多样性呈现出明显的变化趋势。案例

土壤污染生物监测基于生物与土壤环境之间复杂而紧密的相互关系，通过生物在土壤污染条件下的反应来揭示土壤的污染状况。

微生物监测法

微生物监测法土壤微生物是土壤生态系统的重要组成部分，在土壤物质循环、养分转化以及生态平衡维持等方面起着不可或缺的作用。对土壤环境变化有高度敏感性，成为评估土壤污染状况的有效手段之一。

生物监测法的实施步骤

（一）微生物数量和活性测定A.稀释平板计数法：一种经典且常用的微生物计数方法。将采集的土壤样品进行一系列梯度稀释，以降低样品中微生物的浓度，使其在可计数范围内。取适量不同稀释度的稀释液接种到含有特定营养物质的固体培养基平板上。1微生物数量测定

（一）微生物数量和活性测定A.稀释平板计数法：一种经典且常用的微生物计数方法。接种后的平板在适宜的温度和湿度条件下培养一段时间。培养过程中，微生物在培养基上生长繁殖形成肉眼可见的菌落。1微生物数量测定

统计不同稀释度下平板上生长的菌落形成单位数量，根据稀释倍数进行计算，估算出原土壤样品中微生物的数量。

土壤污染监测中，某一区域土壤中微生物数量明显低于正常水平，提示该区域存在土壤污染问题，影响了微生物的生存和繁殖环境。

（一）微生物数量和活性测定B.最大可能数法适用于检测土壤中那些数量较少且不易用平板计数法准确计数的微生物情况。基于统计学原理，通过一系列的稀释和接种到液体培养基中，观察是否有微生物生长产生的特征性变化根据专门的统计表格估算出样品中微生物的最大可能数量。

（一）微生物数量和活性测定2微生物活性测定A.呼吸强度测定生物在进行有氧呼吸时会消耗氧气并产生二氧化碳，通过测定土壤样品中微生物的呼吸强度，可直观地了解其代谢活性。采用密闭容器法或气体分析仪等设备来进行测量。

（一）微生物数量和活性测定2微生物活性测定B.酶活性测定土壤微生物体内含有多种酶，参与了土壤中的各种生物化学反应，是土壤生态系统功能的重要执行者。通过测定酶的活性，深入了解微生物的代谢功能和土壤的生态状况。常用的酶活性测定方法有比色法、滴定法等。

（二）微生物群落结构分析将土壤样品接种到不同类型的培养基上，根据微生物的不同营养需求和生长特性，选择合适的培养基和培养条件。1传统培养方法结合形态学观察土壤中大部分微生物难以在实验室常规条件下培养。部分微生物可以通过传统的培养技术进行分离和培养。培养后，观察微生物的菌落形态、颜色、大小等特征，并结合显微镜观察微生物的细胞形态、结构等，对微生物进行初步分类和鉴定。

（二）微生物群落结构分析2分子生物学方法A.聚合酶链反应技术PCR技术用于检测土壤样品中特定微生物的基因，具有极高的灵敏度和特异性。根据目标微生物的特定基因序列设计引物，以土壤DNA为模板进行PCR扩增。

（二）微生物群落结构分析2分子生物学方法B.基因芯片技术检测土壤样品中大量微生物的基因信息，是一种高通量、快速、准确的微生物群落分析技术。基因探针固定芯片，涵盖微生物基因序列。土壤DNA标记杂交，检测信号强弱知微生物种类丰度。

小结微生物监测法微生物监测法重要的应用价值

土壤污染微生物监测法有什么优势和局限性？思考题