2025年生物分离考试题及答案.docxVIP

2025年生物分离考试题及答案

单项选择题（每题2分，共20分）

1.下列哪种方法不属于沉淀分离法？

A.盐析

B.离心

C.超滤

D.电泳

2.亲和层析的核心原理是？

A.吸附作用

B.沉淀作用

C.离子交换

D.特异性结合

3.生物大分子的分离纯化中，哪一种方法适用于小分子物质的分离？

A.凝胶过滤

B.离子交换层析

C.亲和层析

D.等电点沉淀

4.超滤膜的孔径大小决定了？

A.分子量截留

B.传质速率

C.操作压力

D.电导率

5.下列哪种缓冲液适用于蛋白质分离？

A.HCl

B.Tris-HCl

C.H?SO?

D.NaOH

6.离子交换层析中，树脂的离子类型影响？

A.结合容量

B.分辨率

C.洗脱pH

D.以上都是

7.下列哪种技术可用于蛋白质的初步纯化？

A.凝胶过滤

B.等电点沉淀

C.亲和层析

D.以上都是

8.蛋白质复性过程中，常用的保护剂是？

A.乙醇

B.尿素

C.甘油

D.乙酸

9.下列哪种方法可用于检测蛋白质纯度？

A.SDS

B.紫外分光光度法

C.薄层色谱

D.以上都是

10.生物分离过程中，哪一步骤通常用于去除杂质？

A.粗提

B.纯化

C.结晶

D.干燥

多项选择题（每题2分，共20分）

1.下列哪些属于生物分离方法？

A.盐析

B.电泳

C.蒸馏

D.超滤

2.亲和层析的常见配体包括？

A.抗体

B.标记分子

C.酶

D.多糖

3.凝胶过滤层析的原理包括？

A.分子大小效应

B.吸附作用

C.离子交换

D.溶解度差异

4.超滤膜的特性包括？

A.孔径分布

B.截留分子量

C.耐压性

D.耐化学性

5.缓冲液的选择需考虑？

A.pH值

B.稳定性

C.离子强度

D.成本

6.离子交换层析的影响因素包括？

A.树脂类型

B.pH值

C.离子强度

D.温度

7.蛋白质复性的注意事项包括？

A.缓冲液条件

B.温度控制

C.初始折叠状态

D.存在竞争性分子

8.蛋白质纯度检测方法包括？

A.SDS

B.紫外分光光度法

C.薄层色谱

D.WesternBlot

9.生物分离过程中，常见的纯化步骤包括？

A.粗提

B.精制

C.结晶

D.干燥

10.下列哪些属于蛋白质分离的常见问题？

A.活性损失

B.纯化效率低

C.杂质残留

D.成本过高

判断题（每题2分，共20分）

1.盐析是一种沉淀分离方法。（正确）

2.亲和层析的配体必须与目标分子有高亲和力。（正确）

3.超滤膜只能用于分离大分子物质。（错误）

4.缓冲液的选择对蛋白质稳定性无影响。（错误）

5.凝胶过滤层析适用于分离小分子物质。（错误）

6.离子交换层析中，树脂的离子类型不影响分离效果。（错误）

7.蛋白质复性过程中，必须保证初始折叠状态。（正确）

8.SDS可用于检测蛋白质纯度。（正确）

9.生物分离过程中，粗提步骤通常不需要严格控制条件。（错误）

10.蛋白质分离过程中，活性损失是不可避免的。（正确）

简答题（每题5分，共20分）

1.简述盐析的原理及其在蛋白质分离中的应用。

答：盐析利用高浓度盐溶液降低蛋白质水溶性，使其沉淀。常用于蛋白质的初步纯化，操作简单但可能导致蛋白质变性。

2.简述凝胶过滤层析的原理及其分离依据。

答：凝胶过滤层析基于分子大小效应，大分子物质通过孔隙快，小分子物质通过孔隙慢，从而实现分离。

3.简述亲和层析的原理及其优点。

答：亲和层析利用特异性结合分离目标分子，优点是选择性强、纯化效率高。常用于酶、抗体等高价值蛋白的纯化。

4.简述蛋白质复性的基本步骤及注意事项。

答：蛋白质复性包括变性、缓慢重新折叠、活性恢复。注意事项包括缓冲液条件、温度控制、避免竞争性分子。

讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论盐析和离子交换层析在蛋白质分离中的优缺点。

答：盐析操作简单、成本低，但可能导致蛋白质变性；离子交换层析选择性强、纯化度高，但操作复杂、成本高。

2.讨论凝胶过滤层析和超滤在蛋白质分离中的应用场景。

答：凝胶过滤适用于分子量大小的分离；超滤适用于大分子与小分子的分离，常用于浓缩和缓冲液更换。

3.讨论亲和层析在生物制药中的重要性及应用前景。

答：亲和层析可用于高纯度目标蛋白的分离，在酶、抗体等药物生产中应用广泛，前景广阔。

4.讨论蛋白质分离过程中如何平衡纯化效率与活性保留。

答：选择温和的纯化方法、优化操作条件、避免反复冻融，可提高纯化效率并保留蛋白质活性。