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高效液相色谱法的应用液相色谱操作规程

高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物讨论、环境监测、食品检验及法学检验等领域。

一.在食品分析中的应用

高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物讨论、环境监测、食品检验及法学检验等领域。

一.在食品分析中的应用

1.食品营养成分分析：蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸（邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等）、有机胺、矿物质等；

2.食品添加剂分析：甜味剂、防腐剂、着色剂（合成色素如柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝等）、抗氧化剂等；

食品污染物分析：霉菌毒素（黄曲霉毒素、黄杆菌毒素、大肠杆菌毒素等）、微量元素、多环芳烃等。

二.在环境分析中的应用

多环芳烃（特别是稠环芳烃）、农药（如氨基甲酸脂类，反相色谱）残留等。

三.在生命科学中的应用

HPLC技术目前已成为生物化学家和医学家在分子水平上讨论生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学等必不可少的工具。其在生化领域的应用紧要集中于两个方面：

1.低分子量物质，如氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等的分别和测定。

2.高分子量物质，如多肽、核糖核酸、蛋白质和酶（各种胰岛素、激素、细胞色素、干扰素等）的纯化、分别和测定。

过去对这些生物大分子的分别紧要倚靠于等速电泳、经典离子交换色谱等技术，但都有确定的局限性，远远不能充分生物化学讨论的需要。由于在生化领域中常常要求从多而杂的混合物基质，如培育基、发酵液、体液、组织中对感性趣的物质进行有效而又特异的分别，通常要求检测限达ng级或pg级，或pmol，fmol，并要求重复性好、快速、自动检测；制备分别、回收率高且不失活。在这些方面，HPLC具有明显的优势。

四.在医学检验中的应用

体液中代谢物测定；药代动力学讨论；临床药物监测：

1.合成药物：抗生素、抗愁闷药物（冬眠灵、氯丙咪嗪、安靖、利眠宁、****等）、黄胺类药等。

2.天然药物生物碱（吲哚碱、颠茄碱、**碱、强心甙）等

五.在无机分析中的应用

阳、阴离子的分析等。

液相色谱柱是试验室一种常用的色谱配件，也是液相色谱仪的必不可缺的一部分，那么，我们在做样品分析的时候，假如色谱柱显现柱子柱流失怎么办呢？下面为大家讲讲。

首先明白液相色谱柱柱流失是不可避开的。柱流失程度与什么因素有关？

1、柱流失程度与固定相种类和色谱柱规格有关，一般固定相的量越多，柱流失则相对较高。

2、柱流失与柱温以及载气中氧气的浓度有关。高温下，固定相的分解会加快，因此，高温时的流失会比低温时高。氧气是很多固定相分解的催化剂，特别是在高温时段，强调载气的纯度和液相色谱柱安装的气密性，一方面就是出于氧气会加剧柱流失的考虑。

3、此外，液相色谱柱随着使用次数和时间的加添，固定相的稳定性最后也会发生不可逆的变化，导致柱流失的加添。液相色谱柱柱流失严重情况多显现在进样的溶液类型，5MS的柱子是非极性的，当使用极性溶剂时，就会发生反应而导致大量柱流失，在做测试时确定要留意样品的性质。