高中生物苏教版选择性必修3生物技术与工程第一章第二节第2课时微生物分离纯化和培养的无菌技术80张.pptxVIP

;1.概述平板划线法分离和纯化微生物的过程。

2.概述稀释涂布平板法分离和纯化微生物的过程。

3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。;;;1.平板划线法

(1)概念：是指把含有多种微生物的样品，通过在特定的琼脂平板表面，从而获得的方法。

(2)具体做法：将微生物样品在琼脂平板表面多次做“”的稀释划线，经过这样的操作可得到较多独立分布的微生物。;(3)操作步骤;2.通过平板划线法获得纯化的酵母菌菌落

(1)酵母菌

①酵母菌是真菌，可以进行生殖，也可以进行生殖；

②培养的最适pH为，最适生长温度为；

③可以用液体培养基培养，也可以用固体培养基培养，但要获得纯化的酵母菌菌落，则需要通过培养基培养。;(2)实验目的

尝试通过平板划线法获得纯化的酵母菌菌???。

(3)实验原理

①培养基能满足酵母菌生长、繁殖的营养需要；

②是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法之一。

(4)实验器材和试剂

酵母菌样本(菌种)；接种环、酒精灯、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅；马铃薯葡萄糖琼脂培养基。;(5)实验步骤;(6)结果与分析

①酵母菌被纯化的标准：培养24h后，在划线的出现的单个菌落。

②纯化失败的原因

a.接种环灭菌后未直接在斜面上挑取菌体，菌体可能因为接触高温接种环而。

b.第一次划线前挑取的菌体，则也有可能无法获得由一个酵母菌形成的单个菌落。;(1)倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置()

(2)若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用()

(3)平板划线法接种时，每一次划线前都要挑取菌体()

(4)培养微生物的温度因菌种不同而稍有差异();;2.在琼脂平板表面多次做“由点到线”的稀释划线的目的是什么？;核心归纳;(4)平板冷却凝固后，要将平板倒置。因为平板凝固后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可避免培养基中的水分过快蒸发。

(5)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。;2.平板划线操作中三种灼烧的目的不同;3.实验结果的分析

(1)培养未接种的培养基的目的是检查培养基制备是否合格。未接种的培养基表面若有菌落生长，则说明培养基被污染，应该重新制备；若无菌落生长，则说明未被污染。

(2)在接种酵母菌的培养基上可观察到独立的菌落，这些菌落在颜色、形状和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。

(3)若在培养基中观察到不同形态的菌落，原因可能是菌液不纯，混入其他杂菌，或在实验操作过程中被杂菌污染。;;2.(2021·江苏苏州月考)微生物接种的方法很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是

A.划线操作时，将挑有菌体的接种环插入培养基

B.平板划线后培养微生物时要倒置培养

C.不能将第④次的划线与第①次的划线相连

D.在第②～④次划线前都要对接种环进行灭菌;划线时要避免最后一次的划线与第一次的划线相连，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，C正确；

在第②～④次划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，D正确。;;1.稀释涂布平板法

(1)具体做法：将待分离的材料做一系列的，再取一定量的某一稀释度的菌液，然后用无菌的将菌液均匀地涂布在整个平板表面，使其中的微生物分散，培养后在平板培养基表面形成多个单菌落。

(2)应用：既可用于菌种的，也可以用于微生物的。

(3)混合平板法：将稀释的少量菌悬液与左右的培养基混合均匀后倒入无菌培养皿中，再将培养皿置于合适温度下培养，这样在培养基表面和内部均可长出。;(4)平板划线法的缺点是不能，而则能用于微生物的计数。

(5)计数依据：如果经稀释涂布平板法培养出的都是