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2025/07/23

单抗制备原理

汇报人：_1751850234

CONTENTS

目录

01

单抗的定义与种类

02

单抗的制备方法

03

单抗的应用

04

单抗的未来发展趋势

单抗的定义与种类

01

单抗的定义

单克隆抗体的起源

1975年，Köhler与Milstein利用杂交瘤技术，成功研发了单抗。

单抗的结构特点

单抗具有高度特异性和均一性，由相同的免疫细胞克隆产生，识别单一抗原表位。

单抗的生物活性

单抗能够特异性结合抗原，激活免疫系统，用于疾病诊断和治疗。

单抗的临床应用

单克隆抗体在癌症治疗、自身免疫性疾病治疗中广泛使用，同时也可作为生物标志物用于疾病检测。

单抗的种类

按来源分类

单克隆抗体根据其来源可划分为鼠源、人源、嵌合型以及纯人源单抗，它们在免疫特性和应用领域上存在差异。

按作用机制分类

按照其作用原理，单克隆抗体可分为中和型、激动型和阻断型，分别应用于多种疾病的治疗。

单抗的制备方法

02

杂交瘤技术

01

免疫小鼠

通过给小鼠注射特定抗原，激发其免疫系统产生特异性抗体。

02

融合细胞

将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。

03

筛选杂交瘤

通过HAT选择性培养基挑选出能够制造特定抗体的杂交瘤细胞。

04

单克隆抗体生产

经过挑选的杂交瘤细胞将在体外培养或在体内通过腹水方式生产，从而获取单克隆抗体。

基因工程方法

单克隆抗体的基因克隆

通过PCR技术扩增特定抗体基因片段，实现抗体基因的克隆和表达。

重组DNA技术

采用重组DNA技术将抗体基因嵌入表达载体，随后由宿主细胞进行抗体蛋白质的制造。

抗体库技术

建立庞大的抗体库，并通过挑选出与特定抗原有高度亲和力的抗体，达到快速制造单克隆抗体的目的。

单链抗体技术

构建单链抗体基因

运用基因工程手段，将抗体的重链与轻链的可变区段拼接成一条链，从而构建出单链抗体基因。

表达与纯化

将制作完成的单一链抗体基因引入宿主细胞内进行展示，随后采用亲和层析等技巧进行分离提纯。

抗体库技术

按来源分类

单克隆抗体根据来源差异，主要分为鼠源、人源以及嵌合型单抗，它们各自具备独特的免疫特性和用途。

按作用机制分类

依据其作用机理，单克隆抗体分为中和型和活化型，分别应用于治疗多种病症。

单抗的应用

03

临床诊断应用

单克隆抗体的起源

单抗起源于1975年，由Köhler和Milstein通过杂交瘤技术首次成功制备。

单抗的结构特点

单克隆抗体具备极高的特异性和一致性，源自同一免疫细胞克隆，能精准识别单一抗原位点。

单抗的生物活性

单克隆抗体能精确识别并锁定抗原，激发免疫反应，亦能直接阻断病原体，起到治疗功效。

单抗的临床应用

单抗广泛应用于疾病诊断、治疗和研究，如癌症、自身免疫疾病和感染性疾病。

治疗应用

构建单链抗体基因

利用基因工程技术，将抗体的重链与轻链的可变部分拼接成一条链，从而构建成单链抗体基因。

表达与纯化

将制备好的单一链抗体基因导入宿主细胞，实现其表达，之后采用亲和层析等手段完成其纯化过程。

研究工具应用

免疫小鼠

采用特定抗原对小鼠进行注入，从而激活其免疫系统生成相应的特异性抗体。

融合细胞

融合免疫小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞，生成杂交瘤细胞。

筛选杂交瘤

利用HAT培养基筛选出能够无限增殖并产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

单克隆抗体的生产

将筛选出的杂交瘤细胞进行体外培养或体内腹水生产，获得大量单克隆抗体。

单抗的未来发展趋势

04

技术创新方向

按来源分类

单克隆抗体根据来源不同，可以分为鼠源、人源、嵌合以及全人源抗体，它们各自具有独特的应用特性和优势。

按作用机制分类

单抗根据其作用原理，可区分为中和抗体、激动剂抗体及阻断抗体等，它们适用于不同的治疗方法。

潜在应用领域

单克隆抗体的基因克隆

采用PCR方法对抗体基因片段进行扩增，再将其转入表达载体内，以便进行单克隆抗体的生产。

细胞融合技术

通过细胞融合技术，将能制造特定抗体的B细胞与骨髓瘤细胞结合，从而生成能够持续分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。

基因编辑技术

运用CRISPR/Cas9等基因编辑工具对抗体基因进行精确修改，提高单抗的亲和力和特异性。

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