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关于重组人血白蛋白的系统性表述

人血白蛋白（HSA）作为一种重要的临床急救药物及重要的药物辅料，在医

药，科研及化妆品生产等域应用广泛。随着国内医疗水平及居民收入水平的提

升和对血液制品认知度的提高，血液制品的临床使用量不断增加，市场容量不断

增长，行业快速发展。根据国家医药管理局的报告，2010年全国16城市医院血

液系统用药金额约62亿元，其中白蛋白类药物占据了血液制品的主要份额（大

于50%）。但作为一种血液制品，HSA同时也面临原料短缺及病毒污染等缺陷的

影响。

用基因工程重组人血清白蛋白（rHSA）替代HSA是国际上公认的最有前途

的高新技术途径。

一.什么是重组人血白蛋白

1.定义

通过基因重组的技术将目的蛋白的基因克隆后，将该基因插入到某种生物

（如细菌、酵母、植物，哺乳动物细胞等）中进行复制，然后收集的白蛋白称为

重组人血白蛋白。

2.rHSA的等级分类

按不同的质量标准分为了培养基级、药用辅料级和药用注射级（药用级）三

类，三类级别的重组人血白蛋白生产工艺相同，但最终控制参数不同，药用级白

蛋白质量标准最高。

3.rHSA的表达系统分类

白蛋白（HumanSerumAlbumin,HSA）是一组复杂的大分子蛋白质，必须经过正

确的折叠、组装和翻译后修饰，才能赋予其特定的结构和功能，表达系统是重

组人血白蛋白生产过程中极其重要的环节。

（1）原核表达系统

HSA基因最早就是在原核生物大肠杆菌E（.coli）中表达成功的，Lawn等于1981

年首次报道了rHSA的cDNA序列并首次构建了第一个表达rHSA的表达载体

pHSA,然后在E.coli中表达成功，表达量为细胞总蛋白的7%,但E.coli表达系统

体外很难正确折叠和组装结构复杂的HAS,缺乏翻译后的修饰和加工，表达的蛋

白多形成包涵体，旦纯化较难，所以未能得到有生物功能的蛋白，细菌细胞壁脂

多糖还会造成热反应。因为HSA在原核生物中表达量不高且分泌效果不够理想,

所以研究的点转向其在真核生物细胞中的表达。

2)酵母表达系统

酵母作为单细胞真核生物，既具有原核生物的容易培养、生长繁殖快、相

对易于进行基因工程操作等优点，还具有原核生物缺少的其他优点，如蛋白质翻

译后修饰和加工以获得有生物活性的组蛋白，表达量和分泌量较大，易于产业

化培养，非常适合白蛋白及其他非糖基化血浆蛋白的大规模制备。

研究者们用到的酵母表达系统有毕赤酵母Pichiapastoris),酿酒酵母

Saccharomycescerevisiae)汉逊酵母Hansenulapolymorpha)、克鲁维氏酵母

Kluyveromyceslactis)等。在酉良酒酵母中，Okabayashi等通过构建在染色体LEU2

和HIS4位点上整合的质粒获得能连续分泌rHSA的稳定转化株，每升培养基达到

85mgrHSAo

毕赤酵母表达量和分泌量高且稳定，自身分泌蛋白量小，作为基因表达系统

研究和使用的最多，已基本掌握其生长规律及大规模高密度发酵技术，被认为是

最有发展前景的蛋白质生产工具之一。毕赤酵母非常适合人血白蛋白等非糖基化

血浆蛋白的大规模制备，成为目前rHSA的主要表达系统。

(3)其他表达系统

作为“生物反应器”的转基因动物自1987年以来就引起学者们广泛的关

注。就生产rHSA来说，最理想的表达场所是乳腺，因为乳腺是外分泌器官从而

不会影响转基因动物本身的生理.，表达的蛋白能经过充分的翻译后修饰加工，组

织细胞密度高从而分泌水平高，目标蛋白纯化相对容易。2000年黄淑帧等通过

乳腺表达载体构建、显微注射.、卵母细胞体外成熟和受精以及整合胚移植等技

术成功将HSA基因整合入牛体内，转基因牛研制的总有效率为12.5%rHSA在