血清碱性磷酸酶活性测定第一组.ppt

血清碱性磷酸酶活性测定;酶活力测定与酶法分析;影响酶促反应速度的因素包括底物浓度、酶浓度、ph值、温度、激活剂、抑制剂等。

酶活力单位指：在特定条件下1分钟能将1微摩尔底物转化为底物所需酶量，或转化底物中1微摩尔的有关基团的酶数。

酶的比活力：单位质量酶蛋白或单位体积酶制剂所含有酶活力单位数。

方法：

1.终止测定法（定时法或终点法）

2.动力学分析法（连续监测法或速率法）

3.物质含量的测定方法

;酶法分析

！指应用酶作为工具定量测定某种物质含量的分析方法。

（一）单酶反应定量法

1、直接测定底物的含量

2、由辅酶变化量测定底物量

（二）偶联酶反应定量法

E1E2

ABC

;酶活力测定和酶法分析在医学上的应用;实验目的;实验操作;;立即混匀。用510nm波长比色，以蒸馏水调零点，读取各管吸光度。

计算

ALP活性=（A测定—A对照）/（A标准—A空白）*0.05*100(金氏单位）;临床意义

在临床上，血清ALP测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。

1．血清ALP活性升高：肝胆疾病：阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝癌等；骨骼疾病：由于骨的损伤或疾病使成骨细胞内所含高浓度的ALP释放进入血液中，引起血清ALP活性增高，如纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化病、骨转移癌和骨折修复愈合期等。

2．血清ALP活性降低：比较少见，主要见于呆小病，ALP过少症，维生素C缺乏症。;注意事项

1．底物溶液中不应含有游离酚，如有酚则空白管显红色，说明磷酸苯二钠已经开始分解，应弃去不用。

2．铁氰化钾溶液中加入硼酸有稳定显色作用。该液应避光保存，如出现蓝绿色即应废弃。

3．加入铁氰化钾溶液后必须立即混匀，否则显色不完全。

4．黄疸血清及溶血血清应分别作对照管，一般血清标本可以共用对照管

;谢谢大家！