高中高三生物基因工程及其应用综合测评讲义.pptxVIP

第一章基因工程的概述及其基本工具第二章基因工程的原理与技术第三章基因工程在农业中的应用第四章基因工程在医学中的应用第五章基因工程在工业中的应用第六章基因工程的未来展望

01第一章基因工程的概述及其基本工具

基因工程的诞生与发展1952年DNA双螺旋结构的发现阿德里安·克里克和詹姆斯·沃森发现了DNA的双螺旋结构，为基因工程奠定了理论基础。1972年首次实现DNA重组斯坦利·科恩和赫伯特·博耶首次实现了DNA重组，标志着基因工程的诞生。1973年基因工程的诞生科恩和博耶团队将SV40病毒DNA与lambda噬菌体DNA重组，成功创建了第一个基因工程菌株。1997年克隆羊多莉的诞生苏格兰罗斯林研究所利用基因工程成功克隆了羊“多莉”，展示了基因工程的强大能力。2000年基因治疗的首例成功美国科学家首次实施基因治疗，治疗严重联合免疫缺陷病（SCID），展示了其巨大潜力。

基因工程的四大基本工具限制性内切酶限制性内切酶是基因工程的“剪刀”，能够识别并切割DNA的特定位点。例如，EcoRI是一种常见的限制性内切酶，能识别GAATTC序列并切割，产生粘性末端。DNA连接酶DNA连接酶是基因工程的“胶水”，能够将不同的DNA片段连接起来。例如，T4DNA连接酶常用于连接粘性末端，形成重组DNA。运载体运载体是基因工程的“运输车”，能够将外源DNA导入宿主细胞。例如，质粒是细菌中最常用的运载体，如pUC19质粒，可承载约4kb的外源DNA。DNA聚合酶DNA聚合酶是基因工程的“复制器”，能够合成新的DNA链。例如，TaqDNA聚合酶耐高温，常用于PCR扩增。

基因工程的操作流程获取目的基因PCR扩增：通过PCR技术可以在体外快速扩增特定DNA片段，如Sanger测序中使用的PCR扩增。基因克隆：通过将目的基因插入到载体中，进行扩增和保存。合成生物学：通过化学合成方法，人工合成目的基因。构建基因表达载体选择合适的启动子：启动子是调控基因表达的序列，如CaMV35S启动子是植物中最常用的启动子。选择合适的终止子：终止子是调控基因转录终止的序列。选择合适的标记基因：标记基因用于筛选转化成功的细胞，如抗生素抗性基因。转化宿主细胞电穿孔：通过高压电场形成瞬时孔洞，使DNA进入细胞。化学转化：通过化学方法，如钙离子处理，使细胞膜通透性增加，DNA进入细胞。微生物转化：通过微生物自身的转化机制，将DNA导入细胞。筛选重组菌株抗生素抗性：通过抗生素筛选，选择抗性菌株，确认基因成功导入。荧光标记：通过荧光标记，观察重组菌株的荧光信号，确认基因成功导入。PCR检测：通过PCR检测，确认重组菌株中存在目的基因。

基因工程的伦理与安全基因工程在带来巨大利益的同时，也引发了伦理和安全问题。例如，2018年，中国科学家贺建奎宣布用CRISPR技术编辑婴儿基因，引发全球伦理争议。伦理问题包括基因歧视、基因编辑婴儿和基因隐私。例如，基因歧视可能使某些人群因遗传缺陷被歧视，如囊性纤维化患者的就业歧视。安全问题包括基因污染、食品安全和生物安全。例如，转基因作物可能通过花粉传播，导致野生植物基因污染。国际社会已制定相关法规，如《卡塔赫纳生物安全议定书》，规范基因工程产品的跨境贸易。例如，该议定书要求出口国提供基因工程产品的风险信息，进口国进行风险评估。

02第二章基因工程的原理与技术

基因重组的原理同源重组同源重组发生在相同或高度相似的DNA序列之间，如酵母中的基因置换。异源重组异源重组发生在不同来源的DNA序列之间，如质粒与染色体之间的重组。限制性内切酶的作用限制性内切酶是基因工程的“剪刀”，能够识别并切割DNA的特定位点。例如，EcoRI是一种常见的限制性内切酶，能识别GAATTC序列并切割，产生粘性末端。DNA连接酶的作用DNA连接酶是基因工程的“胶水”，能够将不同的DNA片段连接起来。例如，T4DNA连接酶常用于连接粘性末端，形成重组DNA。基因重组的效率基因重组的效率受多种因素影响，如限制性内切酶的识别频率、DNA连接酶的活性等。例如，EcoRI在GAATTC序列中每6个碱基对出现一次，识别频率为1/6。

PCR技术的原理与应用PCR技术的原理PCR技术包括变性、退火和延伸三个步骤。变性时，高温（95℃）使DNA双链分离；退火时（55-65℃），引物与目标序列结合；延伸时（72℃），TaqDNA聚合酶合成新链。PCR技术的关键参数PCR技术的关键参数包括退火温度、引物浓度和循环次数。例如，退火温度过高会导致引物非特异性结合，过低则结合效率低。PCR技术的应用PCR技术的应用包括基因诊断、病原体检测和基因测序。例如，COVID-19疫情期间，PCR检测成为重要的诊断手段，其灵敏度可达每毫升样本含10个病毒拷贝。PCR技术的优势PCR技术的优势在于灵