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分析检测中标准曲线相关问题探讨!(包含标准曲线制作、检验、使用中问题等)
分析检测的首要任务是定性和定量,定性可以说是有和无的问题,定量是供应待测物质含量范围的一个过程,这当中包含了任何定性定量都有不确定度的含义。而普遍采纳的标准曲线已然是分析检测中的常规工作,本篇内容以讲解加问答的形式探讨标准曲线使用过程中的难点和误区,结合数据处理版面关于标准曲线的问题沟通,以期答疑解惑、共同精进。
内容提要
本文内容共分为【四个部分】
1、标准曲线的本质:系列浓度待测物质与响应的关系,用以推算样品含量。
2、标准曲线的做法:3点以上,至少重复2次,浓度匀称设置。
3、标准曲线的检验:拟合检验、失拟检验和斜率、截距检验。
4、标准曲线使用中的问题。
标准曲线的本质
标准曲线的做法
标准曲线的检验
标准曲线使用中的问题
4.1标准曲线需要人为的增加(0,0)点吗?
不能。通常的标准系列多是配制0,1,2,3mg/L系列这样的说法,没做试验人为添加(0,0)很不妥,由于许多时候0管进入仪器可能也有响应值,这也是我们考察试剂空白的一个重要步骤。这个0管在某些时候特别重要,比如全血铅测定,我们采纳牛血清来基体匹配标准系列,假如此时你用酸做空白或没做试验人为添加(0,0),那你就很难做好标准曲线。所以标准曲线的0管也是做好标准曲线的重要考虑点。
4.2标准曲线需要减掉试剂空白来做吗?
不需要。仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做,工作中我们也常用0管来做仪器调零。其实没有必要那么麻烦,即使空白或0管有响应值,在构建标准曲线时,我们已经认为该响应值就是0浓度,也就是扣除了这个空白的。
4.3什么时候用Y=bX和二次曲线呢?
标准曲线我们通常采纳的是Y=a+bX,曲线拟合完必需要做统计检验,且要做统计完备的线性检验和失拟检验,然后再做a与0的差别检验,假如a与0的统计学上无差异,你就可以考虑用Y=bX的拟合曲线,拟合出来后同样做线性检验和失拟检验,假如线性检验合格(P0.05)且失拟检验合格(p0.05)此时你就可以采纳Y=bX。二次曲线的采纳同样是这样的道理,假如你Y=a+bX时拟合不合格,你就考虑用Y=a+bX+cX2,同样做失拟检验,考察拟合的符合状况。假如Y=a+bX和Y=a+bX+cX2都满意拟合检验和失拟检验合格,则采纳Y=a+bX形式,这样符合统计学上参数最少的统计简洁性原则。
4.4标准曲线去查含量时是先减空白信号算样品含量还是先算出空白含量相减呢?
工作中我们常要减掉空白得到样品含量,现有国家标准方法有的推举先算出空白含量,用样品含量相减,也有推举先用样品信号减空白信号然后去标准曲线推算含量。而且这两种算法经常差距很大。其实这种差距往往是低含量水平常才消失,在低含量水平通过标准曲线推算含量时,本身不确定度就很大。这两种方法都可以。个人推举先用样品信号减空白信号然后去标准曲线推算含量,由于这样出来的含量不确定度要小一些,而先算出空白含量再相减就增加了1次标准曲线推算含量时的不确定度,由于好的测量永久是不确定度小的测量。
4.5如何做两条标准曲线的检验呢?
先从原理上讲:推断两条或多条标准曲线的差异,须检验残差,截距和斜率三项,分别有不同的统计学参数,残差用F检验,截距和斜率采纳较为简单的统计量。2、从实际操作讲:多用协方差分析检验截距和斜率的差异,以SPSS为例:1.先重新整理数据,将y2数据列加到y1下面,变成一个变量y;将x2数据列加到x1下面,变成一个变量x;然后再设定一个新的分组变量group,原来第1组值为1,第2组值为2.2.进行协方差分析(第一步分析斜率是否无差异).Analyze-GeneralLinearModel-UnivariateDependentList:填入y将y做为因变量FixedFactor:填入groupCovaraites:填入x将x做为协变量Model:选CustomModel:填入xgroupx*group留意假如变量填入挨次不一样,结果也会不一样.Sumofsquares下拉列表框:选TypeI然后点击ok,看结果里x*group这一行的Sig.P值,若大于0.05,则接受原假设,即两条回归直线的斜率无差异,否则拒绝.3.再来进行截距的无差异分析其实过程跟上面一样,只是Model里去掉了x*group交叉项.Analyze-GeneralLinearModel-UnivariateDependentList:填入y将y做为因变量FixedFactor:填入groupCovaraites:填入x将x做为协变量Model:选CustomM
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