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2025/07/23
单克隆抗体的制备技术
汇报人：_1751850234
CONTENTS
目录
01
单克隆抗体概述
02
单克隆抗体的制备方法
03
单克隆抗体的应用领域
04
单克隆抗体技术挑战
05
单克隆抗体的未来趋势
单克隆抗体概述
01
定义与特性
单克隆抗体的定义
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的抗体，具有高度的特异性和均一性。
高度特异性
单克隆抗体可精准锁定并与之结合特定抗原部位，适用于疾病检测与治疗。
均一性
单克隆抗体源自单一细胞，故其结构和功能完全一致。
发现与发展历程
单克隆抗体的发现
1975年，CésarMilstein与GeorgeKöhler借助杂交瘤技术，成功制造出单克隆抗体，标志着生物技术领域的重大突破。
单克隆抗体技术的发展
自被发现之后，单克隆抗体技术持续发展，诸如基因工程抗体与全人源抗体的研发，极大地促进了医学研究领域和治疗手段的革新。
单克隆抗体的制备方法
02
杂交瘤技术
免疫小鼠
通过给小鼠注射特定抗原，激发其免疫系统产生特异性抗体。
融合细胞
将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
筛选杂交瘤
通过HAT培养基筛选，获取能够持续分泌特定抗体的杂交瘤细胞。
克隆化培养
对筛选得到的杂交瘤细胞实施克隆化培育，以维持单克隆抗体的稳定性。
基因工程方法
基因克隆技术
基因克隆手段将特定抗体基因导入宿主细胞，以达到大量生成单克隆抗体的目的。
噬菌体展示技术
利用噬菌体展示技术筛选特定的抗体基因，然后通过宿主细胞表达产生单克隆抗体。
细胞融合技术
细胞融合技术，融合了杂交瘤技术与基因工程，通过将特定B细胞与癌细胞相结合，以制备出单克隆抗体。
体外筛选技术
杂交瘤细胞筛选
通过ELISA等方法筛选出能产生目标单克隆抗体的杂交瘤细胞。
单细胞克隆化
通过单独培养杂交瘤细胞，确保所形成每个克隆的抗体展现出一致的特异性。
亲和力成熟
利用基因工程技术对抗体进行改造，提高其与抗原的结合亲和力。
高通量筛选技术
利用流式细胞技术及高通量策略，迅速挑选出具有高结合能力的单克隆抗体。
优化与改进策略
单克隆抗体的定义
单克隆抗体源自单一B细胞克隆的制造，展现出极高的特异性。
高度特异性
单克隆抗体可以准确锁定并与单一表位的特定抗原结合，应用于疾病检测与治疗领域。
均一性
由于单克隆抗体来源于单一细胞系，因此它们在结构和功能上具有高度的一致性。
单克隆抗体的应用领域
03
医学诊断
单克隆抗体的起源
在1975年，Köhler与Milstein通过将骨髓瘤细胞与脾细胞进行融合，实现了单克隆抗体的首次制备成功。
技术的商业化与应用
单克隆抗体技术迅速走向市场，被广泛用于疾病检测、治疗及生物科技研究等多个领域。
治疗应用
杂交瘤技术
通过融合骨髓瘤细胞和免疫B细胞，产生能稳定分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。
噬菌体展示技术
通过噬菌体表面展示技术展示抗体片段，经筛选得到能特异性结合目标抗原的单克隆抗体。
转基因动物技术
通过将抗体基因整合进动物基因，使动物体内能合成单克隆抗体，进而从转基因动物的乳汁中提取抗体。
研究工具
免疫小鼠
通过对小鼠注入特定抗原，激发其产生特异的免疫应答，进而获取高结合力的抗体。
细胞融合
将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，这些细胞能无限繁殖并产生抗体。
筛选杂交瘤细胞
通过HAT培养基筛选出能生成目标抗体的杂交瘤细胞，并排除未成功融合或融合失败的细胞。
单克隆抗体的生产
将筛选出的杂交瘤细胞进行体外培养或体内（腹水）培养，大量生产单克隆抗体。
单克隆抗体技术挑战
04
稳定性与纯度问题
杂交瘤细胞筛选
采用ELISA等技术，筛选出能合成目标单克隆抗体的杂交瘤细胞。
单细胞克隆化
采用有限稀释法或单细胞筛选技术，将杂交瘤细胞进行单独分离并开展克隆培养。
亲和力测定
采用生物传感器或亲和层析技术测定单克隆抗体与抗原的亲和力，筛选高亲和力抗体。
功能性筛选
通过细胞功能实验，如细胞杀伤实验，筛选出具有特定生物学功能的单克隆抗体。
生产成本与规模
单克隆抗体的起源
1975年，Köhler与Milstein利用杂交瘤技术成功研发出单克隆抗体，标志着生物技术领域的重大突破。
技术的商业化与应用
技术的日益成熟使得单克隆抗体在疾病诊断、治疗以及生物研究领域得到广泛的应用。
免疫原性与安全性
单克隆抗体的定义
单克隆抗体源自单一B细胞克隆，展现出极高的特异性。
高度特异性
单克隆抗体能精确识别并结合到特定的抗原表位，用于疾病诊断和治疗。
均一性
单克隆抗体源于单一细胞，故在结构及功能上保持一致，这有助于保障治疗效果的稳定性。
单克隆抗体的未来趋势
05
新技术的开发
抗体基因的克隆
采用PCR技术放大抗体基因部分，再将其嵌入表达载体，为后续的表达步骤做准
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