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生物化学检验复习题含参考答案

1.问题:何谓酶?简述酶的催化特性。

参考答案:酶是一类具有生物催化功能的蛋白质,它们能加速生物体内的化学反应而不被消耗。酶的催化特性包括:

高效性:酶的催化效率远高于无机催化剂,通常能提高反应速率10^6至10^12倍。

专一性:酶对其催化的底物具有高度选择性,一种酶通常只催化一种或一类特定的反应。

温和的反应条件:酶在常温、常压和接近中性的pH条件下即可发挥催化作用。

可调节性:酶的活性可以通过多种方式进行调节,如抑制剂、激活剂、反馈抑制等。

不稳定性:酶的活性易受温度、pH、重金属离子等外界因素的影响。

2.问题:解释米氏方程及其在酶动力学中的应用。

参考答案:米氏方程是描述酶促反应速率与底物浓度之间关系的数学方程,表达式为:\[V=\frac{V_{max}[S]}{K_m+[S]}\]

其中,V是反应速率,\[V_{max}\]是最大反应速率,\[[S]\]是底物浓度,\[K_m\]是米氏常数,表示反应速率达到最大值一半时的底物浓度。

应用:米氏方程用于:

确定酶促反应的动力学参数,如\[V_{max}\]和\[K_m\]。

比较不同酶或同一酶在不同条件下的催化效率。

研究酶的抑制机制,通过双倒数作图(LineweaverBurk图)分析抑制剂类型。

3.问题:简述糖酵解途径的主要步骤及其生物学意义。

参考答案:糖酵解是葡萄糖分解为丙酮酸的过程,主要步骤包括:

葡萄糖磷酸化:葡萄糖在己糖激酶催化下生成葡萄糖6磷酸。

葡萄糖6磷酸异构化:转变为果糖6磷酸。

果糖6磷酸磷酸化:生成果糖1,6二磷酸。

裂解反应:生成两分子的磷酸丙糖(甘油醛3磷酸和二羟基丙酮磷酸)。

氧化和磷酸化:甘油醛3磷酸在甘油醛3磷酸脱氢酶催化下生成1,3二磷酸甘油酸,并产生NADH。

ATP生成:1,3二磷酸甘油酸转化为3磷酸甘油酸,生成ATP。

磷酸转移:生成2磷酸甘油酸。

水合反应:生成磷酸烯醇式丙酮酸。

ATP生成:磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸,再次生成ATP。

生物学意义:糖酵解是细胞获取能量的重要途径,特别是在缺氧条件下;同时为其他代谢途径提供中间产物。

4.问题:描述氧化磷酸化的过程及其在能量代谢中的重要性。

参考答案:氧化磷酸化是线粒体内通过电子传递链和ATP合酶偶联生成ATP的过程:

电子传递链:NADH和FADH2中的电子通过一系列复合体(I、II、III、IV)传递,最终将氧气还原为水。

质子梯度形成:电子传递过程中,质子从线粒体基质泵入膜间隙,形成跨膜质子梯度。

ATP合成:质子通过ATP合酶回流至基质,驱动ADP和Pi合成ATP。

重要性:氧化磷酸化是细胞能量代谢的主要途径,约90%的ATP由此产生,为细胞的各种生理活动提供能量。

5.问题:解释蛋白质变性的概念及其常见原因。

参考答案:蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下,其特定的空间结构被破坏,从而导致其理化性质和生物活性改变的现象。

常见原因:

物理因素:高温、紫外线照射、超声波、剧烈振荡等。

化学因素:强酸、强碱、有机溶剂(如乙醇、丙酮)、重金属离子(如Hg^2+、Ag^+)、尿素、盐酸胍等。

变性后的变化:蛋白质变性后,其溶解度降低、粘度增加、结晶能力消失、生物活性丧失。

6.问题:简述DNA复制的基本过程及其关键酶类。

参考答案:DNA复制是细胞分裂前DNA分子精确复制的过程,基本过程包括:

起始:复制起点解开双链,形成复制泡,DNA解旋酶解开双链。

引物合成:引物酶合成RNA引物。

延伸:DNA聚合酶III在引物基础上延伸新链,前导链连续合成,后随链分段合成(冈崎片段)。

引物去除和填补:DNA聚合酶I去除RNA引物并填补空隙。

连接:DNA连接酶连接冈崎片段,形成完整的新链。

关键酶类:DNA解旋酶、引物酶、DNA聚合酶(III、I)、DNA连接酶。

7.问题:说明PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。

参考答案:PCR(聚合酶链反应)是一种体外扩增特定DNA片段的技术,原理包括:

变性:高温(9498°C)使DNA双链解开为单链。

退火:低温(5065°C)使特异性引物与模板DNA结合。

延伸:中温(72°C

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